1、細胞培養過程中為什么要使用胰酶呢？胰酶的作用是什么？胰酶是一種蛋白酶，酶切位點是肽鏈的Lys或Arg兩個殘基的羧基端肽鏈，通過在特定位置上降解蛋白，使細胞膜上與培養皿壁結合處蛋白降解，從而使兩者分離。這時，細胞由于自身內部細胞骨架的張力以及培養液表面張力可成為球形。圖1.胰酶酶切位點2、使用胎牛血清培養細胞，在使用胰酶消化時發現血清可以終止此過程，這是什么原因？血清終止的原理其實是競爭抑制，就是用過量的牛血清中含有的蛋白和胰酶結合，使胰酶失去消化細胞蛋白的機會。3、為什么使用了胰蛋白酶消化，細胞還是成團的，這可能是什么原因導致的？①消化時間不夠②吹打力度不夠③胰酶消化液濃度不夠④細胞密度過高之后才消化傳代⑤胰酶存儲不當，或者使用了過期胰酶EDTA是乙二胺四乙酸，一種金屬螯合劑。北京胰酶報價

    (不含EDTA含酚紅)性質、用途與生產工藝背景胰酶又名胰醇素、胰液素。白色或淡黃色無定形粉末。系從各種動物胰臟制取的混合物，主要是蛋白酶、脂酶、淀粉酶。溶于水呈微渾溶液。不溶于醇、醚。有引濕性，遇酸、堿及熱即喪失活力，水溶液遇酸、熱、重金屬或單寧酸時產生沉淀。為助消化藥，用于缺乏胰液的***癥。也用于皮革工業和紡織印染，主要用于酶法脫毛。將絞碎的豬胰漿經***、提取、沉淀、脫脂、干燥、粉碎而得。簡介(不含EDTA含酚紅)為細胞培養基，1.不含EDTA含酚紅：含酚紅，（1：250）溶于HBSS溶液，不含鈣鎂。-20℃保存。胰(不含EDTA含酚紅)含，不含EDTA和酚紅，溶于無鈣鎂平衡鹽溶液中，經過濾除菌，可以直接用于培養細胞和組織的消化，通常室溫消化2分鐘左右就消化下大多數貼壁細胞。使用方法(不含EDTA含酚紅)使用說明---貼壁細胞Chemicalbook的消化：a)吸去培養液，用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。b)加入少量胰蛋白酶消化液，蓋過細胞即可，室溫放置1-2分鐘。不同的細胞消化時間有所不同，對于貼壁牢固的細胞可適當延長消化時間。c)顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變化。 江蘇EDTA胰酶價格信息胰酶在細胞培養中的作用和在消化酶中的作用？

細胞傳代消化時所用胰酶濃度?常見濃度為0.25%的胰酶(含有螯合劑)，半貼壁細胞或者對胰酶敏感的細胞，可采用0.05%濃度的胰酶(含有或者不含有螯合劑)進行細胞消化。由于細胞膜上的粘附蛋白需要金屬離子維持其活性，常見的胰酶中含有EDTA等整合劑,如果細胞貼壁不是非常緊密，也可用不含有螯合劑的胰酶進行細胞消化。胰酶對細胞膜上粘附蛋白的損害比較大，如果進行細胞膜上蛋白的研究，建議選擇溫和的細胞消化試劑，盡量減少對細胞膜上蛋白的損傷。此外，由于胰酶自身也是一種蛋白，胰酶也會自己剪切自己,建議胰酶不要反復凍融，拿到手中的大瓶胰酶進行分裝使用。除了常見的胰酶(含有或者不含有EDTA)。

    胰蛋白酶**點評胰蛋白酶能使痰、血凝塊溶化變稀，易于引流排痰，加速創面愈合凈化，促進肉芽**增生，而不損傷正常**，臨床上有消消腫功能。[4]胰蛋白酶其他胰蛋白酶細胞培養胰蛋白酶的作用是使細胞間的蛋白質水解從而使細胞離散。不同的**或者細胞對胰酶的作用反應不一樣。胰酶分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關，在pH為、溫度為37℃時，胰酶溶液的作用能力**強。使用胰酶時，應把握好濃度、溫度和時間，以免消化過度造成細胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質可降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液時應選用不含Ca2+、Mg2+的BSS，如：D-Hanks液。終止消化時，可用含有血清培養液或者胰酶**劑終止胰酶對細胞的作用。1.稱取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液濃度為%，用電子天平準確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水（若用雙蒸水需要調PH到左右）或PBS（D-hanks）液中。攪拌混勻，置于4℃內過夜。2.用注射濾器抽濾消毒：配好的胰酶溶液要在超凈臺內用注射濾器（微米微孔濾膜）抽濾**。3.分裝成小瓶于-20℃保存以備使用可！詞條圖冊更多圖冊參考資料1.胰蛋白酶．化學品數據庫[引用日期2017-05-26].***典**會，***典2010版[M]，北京：**醫*科技出版社。胰酶在PH值7.2-8.0的時候，溶液呈淡紅色。

品名：0.25%胰蛋白酶溶液，1X分類：細胞消化試劑規格：100ML用途：消化試劑，如胰蛋白酶，被用于將粘附細胞從其附著的表面或底物上分離和降解，以及將組織進行游離，以開展原代細胞培養。產品包括2種常用濃度的γ照射豬胰蛋白酶（1：250）以及一種新型非哺乳動物豬胰蛋白酶替代品，稱為ThermoScientificHyQTaseTM.HyQTase是一種蛋白水解酶和膠原水解酶的混合超濾溶液，可以快速消化，同時不損傷細胞。其非哺乳動物配方使它適用于無血清應用，不需要失效或對酶抑制劑。此試劑可使細胞被快速分離，形成單細胞懸浮物，保持高細胞活力，并使傳代時的變異減至**小。細胞培養中胰酶的作用一般是分解脂肪等。山西重組胰酶常用知識

淡黃色的胰酶溶液能放心使用嗎？北京胰酶報價

胰蛋白酶（Trypsin）簡稱胰酶，是一種絲氨酸水解酶，能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基端切斷。在組織細胞的提取、培養，以及體外細胞培養過程中，均會使用到胰蛋白酶消化液，用于水解細胞間蛋白質，使組織或細胞離散成單個細胞。胰酶在37℃pH8.0條件下消化能力**強。常用胰酶工作濃度為0.25%。EDTA可以螯合鈣鎂離子，胰酶溶液中搭配EDTA使用可以加速細胞間連接蛋白的水解，起到增強消化的效果。酚紅是一種pH指示劑，溶液偏堿性時呈紫紅色，偏酸性時呈橘紅色，近中性時呈粉紅色。本產品為0.25%胰蛋白酶消化液，含0.25%胰蛋白酶，溶于Hank’s緩沖液，不含EDTA，無酚紅指示劑，經0.22μm過濾除菌。北京胰酶報價