為什么緩沖溶液的ph值在4.75~7.25之間？

緩沖溶液的緩沖范圍在PKa±16531=4.75±1之間。水合氫離子的濃度取決于弱酸與其共扼堿的濃度比。當加入少量強堿時，酸被中和，導致了氫氧根離子在溶液中很少累積。從而C（A一）的濃度增加，C（HA）的濃度減少。可以看到，雖然加入了強堿，但是溶液里的氫氧根離子變化很少，同時，濃度較大，相對的變化小，兩者比值幾乎無變化，因此根據公式，水合氫離子的濃度變化很小。所以緩沖溶液的ph值在4.75~7.25 長時間或過量使用PBS緩沖液可能會對人體產生耐受性,導致惡心、嘔吐、腹瀉等癥狀。湖南有酚紅緩沖液技術指導

緩沖液的作用和使用注意事項

一、緩沖液的概念緩沖液（Buffersolution）通常是由弱酸及其共軛堿或弱堿及其共軛酸緩沖對所組成的溶液，能夠在加入一定量其他物質時減緩pH的改變。以生物實驗中**常用的一種緩沖液PBS為例，是由Na2HPO4、KH2PO4組成的緩沖對，在PH5.8-8.0范圍內有較強的緩沖能力。二、緩沖液的作用緩沖溶液的作用是在有限的范圍內調整溶液的pH值，使待測溶液的酸度符合分析方法所規定的范圍。例如，苯酚在堿性介質及鐵**鉀存在下，可與4-氨基安替比林反應生成橙紅色的安替比林染料，為了防止芳香胺類的干擾以pH在10士0.2時**為適宜。為此，就需要在待測溶液中加入氨一氯化錢緩沖溶液調整和控制待測溶液的pH為10.0士0.2。 江西DPBS緩沖液技術指導Pbs緩沖也是磷酸鹽緩沖生理鹽水，屬于等張液對于細胞并無毒性作用。

    2.配制方法：將Tris-HCl平衡苯酚與等體積的氯仿/異戊醇（24:1）混合均勻后，移入棕色玻璃瓶中4℃保存。10%(W/V)SDS組份濃度：10%(W/V)SDS配制量：100ml配制方法：1.稱量10g高純度的SDS置于100-200ml燒杯中，加入約80ml的去離子水，68℃加入溶解2.滴加濃鹽酸調節pH值至3.將溶液定容至100ml后，室溫保存。2NNaOH組份濃度：2NNaOH配制量：100ml配制方法：1.量取80ml去離子水置于100～200ml塑料燒杯中（NaOH溶解過程中大量放熱，有可能使玻璃燒杯炸裂)。2.稱取8gNaOH小心地逐漸加入到燒杯中，邊加邊攪拌。3.待NaOH完全溶解后，用去離子水將溶液體積定容至100ml。4.將溶液轉移至塑料容器中后，室溫保存。NHCl組份濃度：NHCl配制量：100ml配制方法：1.在ml的去離子水中加入ml的濃鹽酸（N)，均勻混合。2.室溫保存。5MNaCl組份濃度：5MNaCl配制量：1L配制方法：1.稱取gNaCl置于1L燒杯中，加入約800ml的去離子水后攪拌溶解。2.加去離子水將溶液定容至1L后，適量分成小份。3.高溫高壓**后，4℃保存。20%(W/V)Glucose組份濃度：20%(W/V)Glucose配制量：100ml配制方法：1.稱取20gGlucose置于100～200ml燒杯中，加入約80ml的去離子水后，攪拌溶解。2.加去離子水將溶液定容至100ml。

    PBS緩沖液什么是PBS緩沖液？PBS緩沖液是一種常用的生物化學緩沖液，全稱為磷酸鹽緩沖液（PhosphateBufferedSaline）。PBS緩沖液主要由磷酸鹽、鹽和水組成，pH值一般在。它被***用于生物實驗室中，用于稀釋、洗滌和儲存生物樣品，保持生物樣品的穩定性和活性。PBS緩沖液的組成PBS緩沖液的主要成分包括三個部分：1.磷酸鹽：PBS緩沖液中的磷酸鹽是為了維持緩沖液的酸堿平衡。磷酸鹽能夠抵抗外界酸堿環境的影響，并且能夠穩定細胞的PH值，保護細胞免受外界環境的傷害。2.鹽：PBS緩沖液中的鹽主要是氯化鈉（NaCl），用于調節PBS緩沖液的離子濃度。PBS緩沖液中的適當離子濃度可以提供細胞所需的離子環境，維持細胞的生理功能。3.水：水是PBS緩沖液的基礎成分，用于稀釋磷酸鹽和鹽。純凈的水可以保證PBS緩沖液的質量，避免其他雜質對實驗結果的影響。 在生物體中有三種主要的pH緩沖體系.

    1:50～l:800)后，按行進行包被、洗滌。按列分別加入用稀釋液1:100稀釋的強陽性、弱陽性、陰性參考血清及稀釋液(作空白對照)，保溫，洗滌。加工作濃度酶標抗體，洗滌，加底物顯色，加酸終止反應后讀取A值。選擇強陽性參考血清A值；為0．8左右，陰性參考血清A值<0．1的包被抗原稀釋度為工作濃度。?方陣(棋盤)法選擇包被抗體和酶標抗體的工作濃度將抗體用包被液稀釋為10mg／L、lmg／L、／L三個濃度按行包被，每一個濃度包被三行(每行3孔)，分別在每個濃度包被的***、二、三行中分別加入強陽性抗原，弱陽性抗原和陰性對照，將酶標抗抗體用稀釋液稀釋為1:l000、l:5000、l:10000三個濃度，分別加入每個濃度包被的***、二、三列中。加底物顯色，加酸終止反應，分別讀取A值。以強陽性抗原液A值在，陰性參考A值<**適條件。據此選擇包被抗體和酶標抗體的**佳工作濃度。?二、ELISA**適工作濃度的選擇及標準化操作1**適工作濃度的選擇?1．1間接法測抗體?????酶標抗體工作濃度的選擇：①用IgG進行包被，洗滌。②將酶標IgG用稀釋液作一系列稀釋后分別加入已包被的孔中，保溫、洗滌。③加酸終止反應后，讀取吸光度(A)。讀取A值在1．0時的酶標抗體稀釋度，作為酶標抗體的工作濃度。生化實驗中加入緩沖液的目的和作用。河南PBS緩沖液進貨價

緩沖液是一種能在加入少量酸或堿時抵抗pH改變的溶液。湖南有酚紅緩沖液技術指導

PBS 與 DPBSPBS 和 DPBS 都包括氯化鈉和磷酸鹽緩沖液，是生物學研究中常用的試劑，用于維持 pH 值，同時可大幅度地減少活細胞中的滲透壓休克；然而，與 PBS 相比，DPBS 還包括氯化鉀，配方中可含或不含鈣和鎂以及含或不含葡萄糖和**酸。根據您的具體應用選擇 PBS 或 DPBS。

Dulbecco 的磷酸鹽緩沖液（DPBS）DPBS 與 PBS 的不同之處在于它還包括氯化鉀，并且提供多種配方。它也用于生物應用，水基緩沖液，包括氯化鈉和磷酸鹽緩沖液。

HBSS 與 EBSSHanks 的平衡鹽溶液（HBSS）和 Earle 的平衡鹽溶液（EBSS）都是等滲溶液，用于維持生物應用中的滲透壓和 pH 值。雖然 HBSS 和 EBSS 包括葡萄糖和碳酸氫鈉，用于短期維持生長培養基以外的細胞，但 EBSS 在 5% CO2 下使用，而 HBSS 包含較少的碳酸氫鈉，可以在沒有 CO2 的情況下使用。從各種依應用而定的配方中進行選擇。 湖南有酚紅緩沖液技術指導