在組織細胞的體外培養和原代細胞培養中的組織細胞分散（將組織塊制備成單個細胞懸液）以及傳代細胞培養中，貼壁生長細胞的消化分散均要使用組織細胞消化液。常用的消化液為胰蛋白酶 (Trypsin) ，EDTA 等。胰蛋白酶是一種絲氨酸水解酶，它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側切段，水解細胞間的蛋白質，破壞細胞間的連接，從而使組織或貼壁細胞離散成單個細胞。胰酶分散細胞的活性與組織或細胞的特性、胰酶濃度、溫度和作用時間有關，在PH 8.0和37℃時，胰酶的作用能力**強，因此使用胰酶時，應把握好濃度、溫度和時間，以免消化過度造成細胞損傷。一般常用胰酶的工作濃度為0.25%，而半貼壁細胞或對胰酶敏感的細胞常采用低濃度（0.05%）的胰酶進行細胞消化。由于EDTA能夠螯合Ca2+和Mg2+，從而破壞細胞連接促進細胞的解離，因此在胰酶溶液中常常會加入一定量的EDTA混合使用，以增強解離效果。胰酶用0.05%還是0.25%的？需不需要含酚紅的？江西重組胰酶生產企業

    EDTA-胰蛋白酶的配制1、胰酶是，就是說，盡量不要用水來溶，因為要保持滲透壓。2、EDTA的工作液溶度是－，根據細胞消化的難易程度自己調整。EDTA并不是必須的，容易消化的細胞可不加。EDTA對細胞貼壁性有影響，因此使用時要甚重。如果影響貼壁，但消化時必須要用，那么在用完全培養基終止消化后，可離心棄上清，再加完全培養基培養，可去除EDTA。如果對貼壁沒影響，那么可不離心。3、EDTA的濃度也是質量體積比。和胰酶一起溶于PBS。4、注意，血清可終止胰酶的作用，但不能終止EDTA的作用，對有些細胞來說，終止消化后的離心是必要的。5、胰酶和EDTA在pH為8左右的時候**易溶解，在配制時可先滴幾滴NaOH將pH調至8，注意，胰酶可使溶液變酸，所以要邊溶邊測pH，隨時調整。注意，不可加過量NaOH，否則過堿，細胞會受不了。6、胰酶EDTA相對比較難溶，可用磁力攪拌器，或放入4度冰箱過夜，待溶解后過濾除菌。7、可配2－3乘的胰酶，這樣比較節約時間和濾器，用的時候對上滅菌PBS即可。8、儲存液放在－20度冰箱凍存，使用液放在4度，用的時候不要放在27度水浴鍋溫浴，因為這樣會讓胰酶很快失效，使用前放在室溫下一會，因為加的量很少，所以一般不會凍壞細胞。9、消化時。 山東國產胰酶市場報價胰酶在PH值7.2-8.0的時候，溶液呈淡紅色。

淡黃色的胰酶溶液能放心使用嗎？能，對于胰酶呈黃色的問題，不同品牌也都對此現象進行了測試實驗。變色的胰酶同樣能很好的用于細胞的解離，請放心使用。細胞消化時，胰酶不去除對細胞的影響？細胞消化時，如果消化液中只有胰酶，不含EDTA，不去除是沒有問題的。如果消化液中含有胰酶和EDTA，比較好去除。EDTA是一種化學螯合劑，主要作用在于能螯合Ca、Mg離子，使細胞分離。但EDTA不能被血清中和，消化后要徹底清洗去除，否則細胞易脫壁。胰酶胰酶和EDTA聯合使用可提高消化效率，所以常二者合用。胰酶的保存

    (不含EDTA含酚紅)性質、用途與生產工藝背景胰酶又名胰醇素、胰液素。白色或淡黃色無定形粉末。系從各種動物胰臟制取的混合物，主要是蛋白酶、脂酶、淀粉酶。溶于水呈微渾溶液。不溶于醇、醚。有引濕性，遇酸、堿及熱即喪失活力，水溶液遇酸、熱、重金屬或單寧酸時產生沉淀。為助消化藥，用于缺乏胰液的***癥。也用于皮革工業和紡織印染，主要用于酶法脫毛。將絞碎的豬胰漿經***、提取、沉淀、脫脂、干燥、粉碎而得。簡介(不含EDTA含酚紅)為細胞培養基，1.不含EDTA含酚紅：含酚紅，（1：250）溶于HBSS溶液，不含鈣鎂。-20℃保存。胰(不含EDTA含酚紅)含，不含EDTA和酚紅，溶于無鈣鎂平衡鹽溶液中，經過濾除菌，可以直接用于培養細胞和組織的消化，通常室溫消化2分鐘左右就消化下大多數貼壁細胞。使用方法(不含EDTA含酚紅)使用說明---貼壁細胞Chemicalbook的消化：a)吸去培養液，用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。b)加入少量胰蛋白酶消化液，蓋過細胞即可，室溫放置1-2分鐘。不同的細胞消化時間有所不同，對于貼壁牢固的細胞可適當延長消化時間。c)顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變化。 消化液經過過濾除菌,可以直接用于培養細胞的消化,或者一些組織的消化。

0.25%胰酶是細胞生物學中常用的一種生物試劑，下面匯總一下胰酶使用過程中常見的一些問題。

胰酶的使用濃度是多少？胰酶濃度：常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作為消化液。

胰酶的保存胰酶可在-20℃下保存一年。隨著時間延長，胰酶的消化能力減弱。胰酶可分裝凍存，在使用前從-20℃冰箱取出。盡量避免在4℃長期保存。胰酶使用的時候要注意什么？（1）在使用胰酶細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染。（2）胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長，否則細胞鋪板后生長狀況會較差。 胰蛋白酶可以用于原代細胞的傳代過程中分散組織。云南EDTA胰酶價格對比

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0.25%胰酶和加了EDTA胰酶區別是什么詳細說明

細胞之間是通過CAM（細胞粘性分子）相連的，而很多粘性分子只有在有+2價金屬離子，如Ca2+,Mg2+，的存在下才能行使這種功能。EDTA是鈣離子的鰲合劑，在胰酶中加入EDTA的作用簡單的說就是為了增加胰酶的消化作用，尤其適用于比較難于消化的細胞；同時可以減少胰消化時間，以減少酶對細胞的損傷作用。加入EDTA的消化反應不能通過加入培養液終止，必須離心才能去除EDTA，所以要掌握好消化時間。 江西重組胰酶生產企業