由于培養基的間歇**不需要專門的**設備，投資少，對設備要求簡單，對蒸汽的要求也比較低，且**效果可靠，因此，間歇**是中小型生產工廠經常采用的一種培養基**方法。（三）、培養基的連續**1、定義：連續**也叫連消，將配制好的并經預熱（60～75℃）的培養基用泵連續輸入由直接蒸汽加熱的加熱塔，使在短時間內達到**溫度（126～132℃）。然后進入維持罐（或維持管），使在**溫度下維持3～7分鐘后再進入冷卻管，使其冷卻至接種溫度并直接進入已事先**（空罐**）過的發酵罐內。其溫度一般以126～132℃為宜，總蒸汽壓力要求達到～MPa以上。培養基采用連續**時，需在培養基進入發酵罐前，直接用蒸汽進行空罐**（空消），用無菌空氣保壓，待培養基流入罐后，開始冷卻。**時對培養基的加熱可采用各種加熱器。培養基的冷卻方式有噴淋冷卻式、真空冷卻式、薄板換熱器式幾種方式，其過程均包括加熱、維持和冷卻階段。2、連續**的流程：（1）由熱交換器組成的**系統流程中采用了薄板換熱器作為培養液的加熱和冷卻器，蒸汽在薄板換熱器的加熱段使培養液的溫度升高，經維持段保溫一定時間后，培養基在薄板換熱器的冷卻段進行冷卻。無酚紅培養基避免了酚紅對細胞的潛在毒性作用。甘肅基礎培養基有哪些

    三)、試驗結果：初代培養：使用本發明的消毒方法，消毒成功率能達到80％，誘導培養基萌芽率能達到90％，可以成功建立無菌再生體系。繼代培養：使用本發明的增殖培養基，繡球組培苗增殖倍率能夠達到8～10倍，組培苗高度一致，生長健壯。生根培養：使用本發明的生根培養基，繡球組培苗生根率能夠達到95％，根系發達，健壯，可以成功用于移栽大棚。本發明所指ms培養基是murashige和skoog研制的培養基，其成分配方表見表1。1/2ms培養基是指大量元素含量為ms培養基的一半，其他成分用量相同。表1、ms培養基成分表本發明涉及的植物生長調節劑有：6-ba—6-芐氨基嘌呤；ga3—赤霉素；iba—吲哚丁酸，naa—萘乙酸。本發明中的誘導培養基、增殖培養基和生根培養基均為液體培養基。本具體實施方式的實施例均為本發明的較佳實施例，并非依此限制本發明的保護范圍，故：凡依本發明的結構、形狀、原理所做的等效變化，均應涵蓋于本發明的保護范圍之內。江蘇DMEM/F12培養基DMEM培養基提供了細胞生長所需的基本營養成分。

    3)培養方法：將配制的1/2cs生長培養基分裝于長、寬、高9cm的耐高溫培養盒中，用移液槍吸取帶有無菌水的無菌種子，吹打在無菌濾紙上，用無菌尖頭鑷子將種子均勻點播在培養基上；于溫度22-24℃、濕度50-70％、光照強度1500-2000lux、光照和黑暗交替(光照時間16h、黑暗時間8h)條件下培養。(4)1/2cs生長培養基的培養結果為：哥倫比亞型擬南芥種子在1/2cs生長培養基上的萌發率為100％，培養16d的幼苗，表現為植株健壯，蓮座葉均已伸展，葉色濃綠，根系發達、平均主根長為。如圖1所示。對比培養例1：將1/2cs基本培養基替換為1/2ms基本培養基，其余完全同培養實例1，1/2ms基本培養基的成分及用量如表1所示。1/2ms生長培養基的培養結果為：哥倫比亞型擬南芥種子在1/2ms生長培養基上的萌發率為100％，培養16d的幼苗，表現為植株健壯，蓮座葉部分伸展，葉色濃綠，根系發達、平均主根長為。如圖1所示。培養實例1和對比培養例1的培養結果比較：哥倫比亞型擬南芥在1/2cs生長培養基和1/2ms生長培養基上的萌發率均為100％；在相同條件下培養16d時，與1/2ms生長培養基相比，1/2cs生長培養基中的幼苗長勢更佳，主要表現為蓮座葉長勢更好、根系更為發達。如圖1所示。

    3)擬南芥葉片愈傷**的誘導方法：用手術剪刀剪開長勢良好的無菌葉片，用鑷子將其取出擺放在步驟(1)的誘導培養基中，使傷口接觸培養基；于溫度23-25℃、濕度50-70％、光照強度1500-2500lux、光照和黑暗交替(光照時間16h、黑暗時間8h)條件下培養。(4)擬南芥根愈傷**的誘導方法：用鑷子取出無菌苗的根，用手術剪刀剪開后平鋪于步驟(2)的誘導培養基中，培養條件同步驟(3)。(5)cs誘導培養基的誘導結果為：擬南芥葉片愈傷**誘導時，培養6-8d在切口處出現顆粒狀愈傷**，培養24-26d獲得嫩綠色致密的團塊狀愈傷**，顆粒狀愈傷**誘導率及愈傷**總誘導率均為100％；擬南芥根愈傷**誘導時，培養5-7d在切口處開始出現少量顆粒狀愈傷**，培養20-22d獲得較大體積的淡黃色松脆型愈傷**，且在愈傷**周圍觀察到大量致密分布的白毛，顆粒狀愈傷**誘導率及愈傷**總誘導率均為100％。如圖5所示。對比培養例5：將cs基本培養基替換為ms基本培養基，其余完全同培養實例5，ms基本培養基的成分及用量如表1所示。ms誘導培養基的誘導結果為：擬南芥葉片愈傷**誘導時，培養7-10d在切口處出現顆粒狀愈傷**，培養24-26d獲得嫩綠色致密的團塊狀愈傷**，顆粒狀愈傷**誘導率及愈傷**總誘導率均為100％。F12培養基支持多種細胞的生長和增殖。

    另外，酚紅作為pH值的指示劑被加入到細胞培養基中。酚紅在產物純化過程中會造成干擾，并且具有一定的固醇類***樣作用，如雌***樣作用。當用于哺乳類動物細胞的培養，可能會發生一些固醇類反應。現在商業化細胞培養基中的酚紅含量可根據需求調整。因生物反應器具有pH在線檢測技術，生物反應器培養動物細胞時，酚紅可完全去除。細胞保護劑是保護細胞免受滲透壓變化、剪切力、氧化及氣泡作用等引起的損傷的物質。在使用生物反應器培養動物細胞時，細胞易被機械攪拌和通氣鼓泡產生的流體剪切力和氣泡作用所傷害甚至破損死亡。為降低這種損傷，除優化生物反應器結構和生產工藝外，可在細胞培養液中添加一些保護劑。其主要是通過改變細胞培養基物性或是對細胞具有保護作用的物質，常用的種類有血清、白蛋白、聚已二醇（PEG）、非離子性表面活性劑PluronicF68或是其他一些高分子聚合物等。3.細胞培養基的理化性質動物細胞在細胞培養基中不僅能存活，還要分裂增殖，合適的滲透壓、pH值等理化性質是細胞培養基必須具備的前提條件。動物細胞大多數需要輕微的堿性條件，適宜pH在～。細胞培養基的pH值通常需經校正的pH計來測定。在細胞生長過程中，隨細胞數量的增多和代謝活動的加強。DMEM培養基提供了適宜的pH值和滲透壓。甘肅減血清培養基生產企業

F12培養基提供了豐富的營養，支持細胞增殖。甘肅基礎培養基有哪些

    培養實例2：蘭茲貝格型擬南芥無菌植株培養培養實例2與培養實例1不同的地方在于：步驟(1)所用種子為蘭茲貝格(ler,landsbergerecta)型擬南芥種子，蘭茲貝格擬南芥較哥倫比亞擬南芥具有更早的花期，在適宜條件下培養，可以獲得處于各發育時期的擬南芥無菌***，包括根、胚軸、葉柄、子葉、蓮座葉、莖、花、角果等，其余完全同培養實例1。1/2cs生長培養基的培養結果為：蘭茲貝格型擬南芥種子在1/2cs生長培養基上的萌發率為100％，培養28d的幼苗，表現為植株健壯、平均株高為，蓮座葉發達、平均**大蓮座葉長為，葉色濃綠，根系粗壯、平均主根長為，花序含有較多花朵，花粉形態和活力均正常、平均有活力的花粉為％。如圖2所示。對比培養例2：將1/2cs基本培養基替換為1/2ms基本培養基，其余完全同培養實例2，1/2ms基本培養基的成分及用量如表1所示。1/2ms生長培養基的培養結果為：蘭茲貝格型擬南芥種子在1/2ms生長培養基上的萌發率為100％，培養28d的幼苗，表現為植株健壯、平均株高為，蓮座葉發達、平均**大蓮座葉長為，葉色濃綠，根系粗壯、平均主根長為，花序發育良好，花粉形態和活力均正常、平均有活力的花粉為％。如圖2所示。甘肅基礎培養基有哪些