分光光度計是一種分析測量光譜的儀器,因為應用需求的不同,分光光度計有著不同的種類。分光光度計按照波長及應用領域的不同可以分為:
(1)可見光分光光度計:用來測量待測物質對可見光(400~760nm)的吸光度并進行定量分析的儀器,稱為可見分光光度計。可在600nm測定細菌細胞密度。
(2)紫外分光光度計:紫外可見分光光度計用來測量待測物質對可見光或紫外光(200~760nm)的吸光度并進行定量分析的儀器。可以測定核酸和蛋白的濃度,也可以測定細菌細胞密度。紫外分光光度計又可分為單光束,假雙光束,雙光束。
(3)紅外分光光度計:一般的紅外光譜是指大于760nm的紅外光譜,這是研究有機化合物**常用的光譜區域,能分析各種狀態(氣、液、固)的試樣。
(4)熒光分光光度計:熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發出的熒光光譜的一種儀器。應用于科研、化工、醫藥、生化、環保以及臨床檢驗、食品檢驗、教學實驗等領域。
(5)原子吸收分光光度計:該法主要適用樣品中微量及痕量組分分析常規儀器之一。是材料分析及質量控制部門進行常量、微量金屬(半金屬)元素分析的有力工具。
現今生命科學領域比較流行的超微量分光光度計是屬于紫外分光光度計的一種。
不同物質的吸收光譜是不同的.因此根據吸收光譜,可以鑒別溶液中所含的物質。山西國產超微量分光光度計核酸檢測
Micro Drop蛋白質檢測功能:
Protein A280檢測類型:
蛋白質具有很強的多樣性,Protein A280功能主要用于檢測那些含有Trp,Tyr殘基或者含有Cys-Cys二硫鍵的純蛋白,這些蛋白在280nm處吸光值較大。這個方法不需要構建標準曲線,在檢測吸光值后,軟件會直接計算蛋白濃度。與核酸檢測一樣,Protein A280光譜圖顯示的是10mm光程下的數據。
Micro Drop在基座模式下可以比較高檢測400mg/ml的BSA而不用稀釋。軟件可以自動使用不同光程來檢測每個樣品的吸光值。
在樣品的10mm吸光值>3.0(>4.5mg/ml BSA)時可以選擇小容量檢測。
遼寧性價比高超微量分光光度計單光束分光光度計是由一束經過單色器的光,輪流通過參比溶液和樣品溶液,以進行光強度測量。
超微量分光光度計比色法測定蛋白質濃度:
BCA法:這是一種較新的、更敏感的蛋白測試法。要分析的蛋白在堿性溶液里與Cu2+反應產生Cu+,后者與BCA形成螯合物,形成紫色化合物,吸收峰在562nm波長。此化合物與蛋白濃度的線性關系極強,反應后形成的化合物非常穩定。相對于Lowry法,操作簡單,敏感度高。但是與Lowry法相似的是容易受到蛋白質之間以及去污劑的干擾。
Bradford法:這種方法的原理是蛋白質與考馬斯亮蘭結合反應,產生的有色化合物吸收峰595nm。其比較大的特點是,敏感度好,是Lowry和BCA兩種測試方法的2倍;操作更簡單,速度更快;只需要一種反應試劑;化合物可以穩定1小時,方便結果;而且與一系列干擾Lowry,BCA反應的還原劑(如DTT,巰基乙醇)相容。但是對于去污劑依然是敏感的。**主要的缺點是不同的標準品會導致同一樣品的結果差異較大,無可比性。
測試在紫外區有吸收的樣品時用石英比色皿,測試只在可見光區有吸收的樣品時使用玻璃比色皿。石英比色皿在可見和紫外光區沒有吸收,而玻璃比色皿在紫外區有吸收,所以不能用于紫外光區。對于一般的非光學專業人員,用眼睛是不能分開的兩種比色皿的。但是兩者硬度差別很大很大。石英比色皿比玻璃比色皿硬度大(***值)幾十倍,如果把兩個對磨,石英比色皿將很少被磨損,而玻璃比色皿磨損非常大。由于石英比色皿的透光范圍從0.12-4.5微米,***的譜段范圍內沒有任何吸收峰。而玻璃比色皿只有0.4-4微米,且有許多離子吸收峰。所以,石英比色皿要比玻璃比色皿優越的多,化驗數據更準確、更可靠。
熒光分光光度計和紫外可見分光光度計是實驗室常用的光學儀器。
分光光度計就是利用分光光度法對物質進行定量定性分析的儀器。
分光光度計的結構:
各種型號的分光光度計基本結構都相同,由如下五種部分組成:
1)光源(鎢燈、鹵鎢燈,氫弧燈,氘燈、氙燈或激光光源);
2)單色器(濾光片、棱鏡、光柵、全息柵);
3)樣品吸收池;
4)檢測系統(光電池、光電管、光電倍增管);
5)信號指示系統(檢流計、微安表、數字電壓表、示波器、微處理機顯像管)。
光源-單色器-樣品吸收池-檢測系統-信號指示系統。
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每種核酸的分子構成不一,因此其換算系數不同。定量不同類型的核酸,事先要選擇對應消光因子。安徽性能穩定超微量分光光度計探針檢測
Micro Drop超微量每次測量完畢后,用蒸餾水清潔上下光纖端面。山西國產超微量分光光度計核酸檢測
超微量分光光度計檢測蛋白A280:
蛋白和核酸不一樣,具有很強的多樣性。Protein A280功能應用于檢測那些含有Trp、Tyr殘基或者含有Cys-Cys二硫鍵的純蛋白,這些蛋白在280nm吸光度明顯。Protein A280功能不需要構建標準曲線,而是檢測吸光度后,直接計算蛋白濃度。
Protein A280顯示紫外吸收光譜,檢測280nm處的吸光度后計算濃度(mg/ml)。和核酸檢測一樣,Protein A280記錄顯示的是10mm光程下的數據。
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