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低成本國產(chǎn)產(chǎn)品同樣實(shí)現(xiàn)MSD的多重蛋白指標(biāo)檢測功能

來源: 發(fā)布時(shí)間:2025-01-10

MSD超敏電化學(xué)發(fā)光技術(shù)由美國Meso Scale Discovery公司研發(fā)。與傳統(tǒng)的ELISA相似,MSD也是通過雙抗體夾心法來定量目標(biāo)蛋白。但其獨(dú)特之處在于其采用了石墨烯材質(zhì)的電極板作為反應(yīng)容器,這種材質(zhì)能好增加捕獲抗體的固載量。同時(shí)利用SULFO-TAG(三聯(lián)吡啶釕)替代傳統(tǒng)的酶或熒光染料標(biāo)記在檢測抗體上,當(dāng)電極板通電時(shí),SULFO-TAG發(fā)生一系列氧化還原反應(yīng),產(chǎn)生光信號(hào),隨后被儀器內(nèi)的CCD相機(jī)捕獲。MSD是電化學(xué)和化學(xué)發(fā)光兩個(gè)過程的結(jié)合,可將許多非特異信號(hào)予以排除,受樣本性質(zhì)的影響更小,對(duì)于各類生物學(xué)樣本的兼容度高。MSD的一大特點(diǎn)是超高的靈敏度及更寬的線性范圍,主要原因是使用石墨烯底板使得抗體包被量比常規(guī)孔板提高10倍的同時(shí),增加試劑和耗材的成本,操作步驟與傳統(tǒng)ELISA類似,繁瑣的人工操作步驟同樣少不了。

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA:單個(gè)樣本加入到單個(gè)芯片孔,可同時(shí)測試2-6個(gè)檢測項(xiàng)目;

 

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA與傳統(tǒng)免疫試驗(yàn)主要區(qū)別在于能夠在飛升大小的孔中捕獲單個(gè)分子,允許單個(gè)磁珠信號(hào)的數(shù)字化讀取。用特異性抗體修飾的微珠捕獲靶標(biāo)生物標(biāo)志物,在生物標(biāo)志物濃度很少時(shí),每個(gè)珠子能捕獲一個(gè)或零個(gè)靶蛋白質(zhì)分子,通過免疫反應(yīng)后形成免疫復(fù)合物,然后用能夠產(chǎn)生熒光產(chǎn)物的量子點(diǎn)報(bào)告信號(hào)。通過把單個(gè)珠子限定在飛升反應(yīng)室中,通過微阱芯片結(jié)構(gòu)“卡住”微珠,使得微珠陣列化排布的方式,使用熒光成像來檢測單個(gè)格子的熒光信號(hào)進(jìn)行定量。這種一個(gè)陣列化區(qū)域預(yù)埋一種特異性抗體修飾的微珠,一個(gè)通道內(nèi)可以設(shè)計(jì)多個(gè)這樣的陣列化區(qū)域,不同區(qū)域間預(yù)埋不同捕獲抗體的微珠。這種基于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的數(shù)字化單分子檢測方法(Digital ELISA)在幾十微升的樣品中檢測到少至約 10-20個(gè)量子點(diǎn)標(biāo)記的復(fù)合物。

數(shù)字 ELISA 試劑盒的優(yōu)點(diǎn)

節(jié)省時(shí)間 - 從樣品到結(jié)果只需30分鐘

節(jié)省樣本 - 只需低至10μL的樣品體積

多重檢測 - 同時(shí)檢測10種生物靶標(biāo)

靈敏度 - 精確定量下限低至0.2pg/mL

高通量可選擇4,8,16通道芯片同時(shí)檢測

操作簡便 - 全自動(dòng)化儀器加樣清洗,或者選擇人工加樣清洗

芯棄疾JX-8BLuminex,MSD,Simoa,傳統(tǒng)ELISA不同檢測蛋白技術(shù)比較,在靈敏度,檢測時(shí)間,檢測成本上更顯優(yōu)勢。

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISAMSD工作流程步驟的比較表。

MSD是基于Elisa原理的升級(jí),但是加樣步驟與傳統(tǒng)ELISA類似,同樣繁瑣,耗時(shí)4-5h

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA試劑盒的5個(gè)步驟

MSD 試劑盒需8個(gè)步驟

1.樣本和標(biāo)記抗體的量子點(diǎn)混合孵育5-10min

1.用至少150μL/孔的洗滌緩沖液清洗酶標(biāo)板三次板

2.全自動(dòng)化加樣或者移液槍加樣

2.每孔加入50μL/準(zhǔn)備好的樣品、校準(zhǔn)品或?qū)φ掌?/span>

3.孵育5-10min

3.用粘性封板膜密封酶標(biāo)板,并在室溫下?lián)u動(dòng)孵育2h

4.清洗10min

4.用至少150μL/的洗滌緩沖液清洗酶標(biāo)板三次

5.拍照計(jì)數(shù)

5.每孔加入25μL檢測抗體溶液。用粘性封板膜密封酶標(biāo)板,并在室溫下?lián)u動(dòng)孵育2h


6.用至少150μL/孔的洗滌緩沖液清洗酶標(biāo)板三次


7.每孔加入150 μL的讀數(shù)緩沖液


8.使用MSD儀器分析酶標(biāo)板

 

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISAMSD工作流程步驟的比較表。

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA試劑盒的5個(gè)步驟

MSD 試劑盒需8個(gè)步驟

1.樣本和標(biāo)記抗體的量子點(diǎn)混合孵育5-10min

1.用至少150μL/孔的洗滌緩沖液清洗酶標(biāo)板三次板

2.全自動(dòng)化加樣或者移液槍加樣

2.每孔加入50μL/準(zhǔn)備好的樣品、校準(zhǔn)品或?qū)φ掌?/span>

3.孵育5-10min

3.用粘性封板膜密封酶標(biāo)板,并在室溫下?lián)u動(dòng)孵育2h

4.清洗10min

4.用至少150μL/的洗滌緩沖液清洗酶標(biāo)板三次

5.拍照計(jì)數(shù)

5.每孔加入25μL檢測抗體溶液。用粘性封板膜密封酶標(biāo)板,并在室溫下?lián)u動(dòng)孵育2h


6.用至少150μL/孔的洗滌緩沖液清洗酶標(biāo)板三次


7.每孔加入150 μL的讀數(shù)緩沖液


8.使用MSD儀器分析酶標(biāo)板

 

芯棄疾JX-8BMSD主要參數(shù)對(duì)比

比較項(xiàng)目

芯棄疾JX-8B

MSD

檢測下限

0.23 pg/mL

0.05 pg/mL

耗時(shí)

0.5 h

4-5 h

所需樣品體積

10 μL

25 μL

理論重?cái)?shù)

10

<10

線性范圍

4 log

56 log

設(shè)備耗材成本

(包括全自動(dòng)加樣儀+熒光掃描儀)

 

MSD是基于Elisa原理的升級(jí),但是加樣步驟與傳統(tǒng)ELISA一樣多,操作繁瑣,耗時(shí)長達(dá)4-5h另外定制可導(dǎo)電石墨烯反應(yīng)板或384孔電極板增加檢測成本。

芯棄疾JX-8B全自動(dòng)加樣設(shè)備,樣本加樣到熒光掃描出結(jié)果只需要0.5h,較MSD縮短了4h,讓檢測變得更快捷簡便。耗材使用成本大幅降低,讓每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都能用的起的亞皮克的高性能芯片。

好品質(zhì)數(shù)字 ELISA 試劑盒可幫助您穩(wěn)定、可靠、快速地檢測10種特異性靶標(biāo)蛋白。4,8,16通道數(shù)字ELISA 試劑盒可供選擇,包括完整組分的即用型SA-Biotin試劑盒,可自行優(yōu)化檢測方法的整套試劑,以及試劑技術(shù)支持,可選擇購買自動(dòng)加樣設(shè)備或手動(dòng)加樣,為您的研究項(xiàng)目提供靈活性和便利性。

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