Genovis提供FabRICATOR（IdeS）驗證包。三種不同批次的凍干酶，用于驗證基于FabRICATOR的分析方法。FabRICATOR（IdeS）是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶，可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體，產生均質的F（ab'）2和Fc片段。FabRICATOR酶已成為生物制藥行業中使用的工具，用于表征用于zhiliao用途的單克隆抗體、Fc融合蛋白、ADC和生物仿制藥。每批FabRICATOR酶在釋放前都經過嚴格的酶活性、特性和純度測試。FabRICATOR驗證試劑盒由三批凍干酶組成，使方法驗證更容易。每批都附有一份分析證書。QC應用的簡化方法驗證；批次間變異性評估的理想形式；提高批量放行檢測性能的可信度。用 Genovis的GlySERIAS Immobilized消化Romiplostim，產生均質的 Fc/2。河北GlycINATORIdeS蛋白酶蛋白組學

Blinatumomab（一種對 CD19 和 T 細胞標志物 CD3 具有特異性的 BiTE 分子）的研究級生物仿制藥在室溫下用固定化過夜的 Genovis的GlySERIAS 消化。通過LC-MS對消解樣品的直接分析表明，所有三個連接子區域均被消解，α-CD3 VL和VH鏈洗脫為一個色譜峰，α-CD19 VH和VL鏈作為單獨的峰洗脫。來自連接的 α-CD3 VH 和 α-CD19 VH 結構域的小峰顯示該短連接子未完全消化，表明 GlySERIAS 對短連接子的活性較低。與完整的蛋白質分析相比，四個結構域的分離提供了具有單同位素分辨率的高質量光譜。可以觀察到每個結構域的幾個不同變體，剩余的連接子殘基數量不同。在色譜分離過程中，α-CD3 VH結構域無法從α-CD19 VH結構域完全基線分離，導致在相關質譜中觀察到一些共洗脫。四個結構域的分離產生了有關在完整蛋白質水平上鑒定的蛋白質修飾位置的信息。例如，在完整水平上鑒定的 37 Da 的蛋白質修飾被分配給 α-CD3 VH 鏈。此外，240Da 和 320da 的兩個修飾分別被分配給 α-CD3 VL 結構域。后者還含有一個帶有五六個組氨酸殘基的 His 標簽。這些數據證明了使用 Genovis的GlySERIAS Immobilized 對包含多個柔性連接子蛋白進行質量控制的中級工作流程的強大功能。甘肅IgGZEROIdeS蛋白酶通過將酶偶聯到樹脂上，可以增加酶與蛋白質的比率，從而可以進一步加速反應，以獲得更完整的蛋白質的消化。

IgA 消化酶的 IgASAP 家族特異性消化血清和分泌型人 IgA 以生成 Fab 和 Fc 片段。IgASAP Sub1 特異性消化人 IgA1，而 IgASAP Sub1+2 同時消化人 IgA1 和 IgA2m1。 Sub1+2 特異性消化鉸鏈上方的 IgA1 和 IgA2m1。兩種酶都產生完整且均質的 Fab 和 Fc 片段。為了獲得純和完整的Fab片段，使用Genovis的GingisKHAN Fab Kit進行人IgG1的消化和抗體片段的后續純化。通過與 GingisKHAN 孵育，然后在 CaptureSelect? 人 CH1 離心柱上親和純化，在曲妥珠單抗上證明了完整的片段生成。樣品的酶和Fc部分存在于色譜柱的流通中，Fab很容易通過降低pH洗脫。使用該試劑盒，可以制備 0.5 mg 至 2 mg 人 IgG1 的 Fab 片段。Genovis同時提供IdeS酶的純化試劑盒。

一些應用（如結合研究）具有高度靈敏度，因此在制備中需要不含殘留酶的純抗體片段。因此，Genovis的 IgG 特異性蛋白酶也以固定化酶提供，可快速輕松地生成均質 F（ab'）2 和 Fc/2 片段。FabRICATOR Immobilized 含有固定化的 FabRICATOR （IdeS），用于制備來自多種 IgG 的 F（ab'）2 和 Fc 片段（對于兔 IgG，請咨詢），而小鼠 IgG2a 和 IgG3 可以使用含有 FabRICATOR Z Immobilized 的 FabRICATOR Z Fab2 試劑盒進行處理 。 為了生成和純化完整的 F（ab'）2 和 Fc/2 片段，使用 FabRICATOR Fab2 試劑盒處理曲妥珠單抗，并通過 SDS-page 進行分析。首先，在室溫下在FabRICATOR固定化離心柱上消化抗體15分鐘，然后進行短離心步驟。在 CaptureSelect ? 離心柱上純化 F（ab'）2 片段，并通過降低 pH 值，然后立即調整回中性 pH 值，一步洗脫結合的 Fc 片段。使用 FabRICATOR Fab2 試劑盒從酶切到收集片段的過程大約需要 1 小時使用 Genovis的GlySERIAS Immobilized 對包含多個柔性連接子蛋白進行質量控制的中級分析方法具有強大的功能。

在Genovis，我們的策略是幫助客戶進行中級（或亞基）分析，這是我們的工作，特別是我們的蛋白質酶切產品。完整質量和肽圖譜是蛋白質表征的常用方法，我們發現，與簡單但信息有限的完整質量和高度復雜但信息豐富的肽圖譜相比，中級方法具有優勢。通過執行中級描述，您可以生成從完整的質量實驗中獲得的所有信息，具有額外的優勢。在對抗體進行完整質量分析時，很難明確地識別某些修飾。質譜儀器正在改進，可以更有效地分析更大的分子，但通過使用我們的SmartEnzymes，如IdeS，可以將抗體分解成更小的片段，這提高了這些實驗可以執行的分辨率，因此，增加了鑒定修飾的信心。此外，你不僅能夠更好地識別修改，而且你能夠將它們定位到蛋白質上的單個結構域，這是你在完整水平上無法做到的。Genovis的FabRICATOR（IdeS）酶將ADC（基于 IgG）消化成其亞基，用于表征這類復雜的藥物。甘肅FabDELLOIdeS蛋白酶抗體酶切

Genovis的策略是幫助客戶進行亞基分析，特別是我們的蛋白質酶切產品，如IdeS蛋白酶。河北GlycINATORIdeS蛋白酶蛋白組學

LC-MS中級分析是一種被大眾接受的分析方法，用于快速表征mAb和其他基于IgG的生物制藥。它有助于理解多種關鍵質量屬性 （CQA），例如糖基化、氧化和 C 端賴氨酸剪切。這種關于翻譯后修飾（PTM）的詳細知識是生物制藥開發和制造所必需的。Genovis的FabRICATOR HPLC酶色譜柱，可快速進行單克隆抗體的柱上酶切，并產生一致的亞基。該色譜柱含有固定化的FabRICATOR（IdeS）酶，可在鉸鏈下方快速且特異性地消化IgG，產生F（ab'）2和Fc片段，而不會出現任何過度消化的風險。為了減少樣品處理并為樣品制備提供自動化解決方案，FabRICATOR被共價固定在樹脂上，并裝在適用于HPLC的PEEK色譜柱硬件中。使用FabRICATOR HPLC色譜柱，只需稍作修改，即可使用標準HPLC-MS裝置自動生成抗體亞基。然后，FabRICATOR HPLC色譜柱上消解產生的亞基被捕獲在在線連接的反相（RP）色譜柱的柱頭上。河北GlycINATORIdeS蛋白酶蛋白組學