Genovis的FabRICATOR是一種半胱氨酸蛋白酶,它對許多不同的物種和IgG亞類都有活性,包括人IgG亞類1-4以及猴子、兔子、大鼠和綿羊IgG的一些亞類。FabRICATOR在鉸鏈下方的單個位點進行消化,生成F(ab’)2和Fc/2子基,可以進一步還原生成Fd’,輕鏈和F/2子基是必需的。FabRICATOR(IdeS)通過蛋白-蛋白相互作用與目標抗體工作,這說明了它的高特異性。事實上,它在單個位點消化意味著使用FabRICATOR時沒有過度消化的風險,其高特異性也意味著相同的消化方案可以作為平臺方法應用于許多不同的抗體。FabRICATOR(IdeS)不需要還原條件來獲得良好活性,也不需要任何額外的輔助因子,它將在不同生理緩沖中發揮作用。這意味著按照下面的鉸鏈消解,您將生成F(ab’)2和Fc/2片段用于分析或其他應用。為了獲得更均勻的度拉糖肽融合蛋白的消化產物。河北FabRICATORIdeS蛋白酶蛋白組學
Genovis集團由瑞典GenovisAB和美國全資子公司GenovisInc.組成。該公司在納斯達克上市。如需了解更多信息,請訪問投資者關系。Genovis的經營理念是為生物制藥和研究行業的客戶提供工具,以促進和節省開發新治療方法和診斷的時間。Genovis酶產品,稱為SmartEnzymes,被世界各地的科學家使用,創新的產品形式促進了生物藥物的開發和質量控制。通過在2020年收購QEDBioscience,產品組合已擴大到包括用于研究、生物藥物開發和診斷檢測的抗體和試劑。在官網上閱讀有關QED的更多信息Genovis研發活動的基石是客戶關系,使產品開發能夠滿足客戶需求。與專注于表征新酶、開發新工作流程和新靶點抗體的學術團體的合作同樣有價值。河北FabRICATORIdeS蛋白酶蛋白組學含有富含甘氨酸的連接子的各種mAb片段進行詳細表征的中級方法。
其他基于 IgG 的生物制藥需要仔細表征和監測關鍵質量屬性,例如氧化、糖基化和其他翻譯后修飾。與抗體的克隆選擇、工藝開發和穩定性研究相關的大量樣品通常通過液相色譜質譜 (LC-MS) 進行分析。然而,在LC-MS之前進行足夠規模的樣品制備通常具有挑戰性。為了解決樣品制備的挑戰,Genovis將半胱氨酸蛋白酶FabRICATOR(IdeS)固定在磁性瓊脂糖珠上,現在稱為FabRICATOR MagIC。FabRICATOR固定在磁珠上,可同時快速自動消化多種抗體,促進中級表征工作流程。Genovis的FabRICATOR MagIC 如何以較少的用戶交互減少實驗和操作時間,降低樣品處理錯誤的風險,同時提高通量。
與IdeS不同,為了獲得更均勻的度拉糖肽融合蛋白的消化產物,用Genovis的GlySERIAS固定化蛋白質消化該蛋白質,該蛋白由與瓊脂糖珠共價偶聯的GlySERIAS酶組成。通過將酶偶聯到樹脂上,可以增加酶與蛋白質的比率,從而可以進一步加速反應,以獲得更完整的連接子消化。此外,該酶不會存在于樣品制備中,可能會干擾樣品分析。為了進行比較,度拉糖肽在37°C下用GlySERIAS固定化過夜,或用GlySERIAS凍干1小時并在37°C下過夜消化。 為了降低樣品復雜性,使用內切糖苷酶GlycINATOR凍干去除Fc聚糖,并減少鏈間二硫鍵。通過反相LC-MS對樣品的分析表明,GlySERIAS Immobilized幾乎完全消化了Fc結構域中的連接子,留下了接近均質的Fc/2產物,其中含有來自連接子的一個絲氨酸殘基。用 GlySERIAS 凍干 1 小時或過夜消化,兩者都會產生幾種 Fc 產物,并附著不同數量的絲氨酸和甘氨酸殘基。GLP-1肽在所有三個樣品中以兩種變體存在。使用GlySERIAS固定化消化的均質Fc/2能夠詳細研究特定于Fc區域的質量屬性。此外,在樣品中未觀察到干擾分析的酶峰。作為補充,Fc/2 產物在用 GlySERIAS 凍干消化后殘留部分連接子,有助于研究位于 GS 連接子的修飾。但要在親和步驟中捕獲 Fc 片段,您需要另一種填料。
樣品制備的條件可能會在樣品中誘發偽影,因此需要避免高溫和堿性pH值進行質譜分析。如果可能的話,避免多個步驟并在一鍋反應中進行消化和還原也可能是有益的。與IdeS不同,為了探索Genovis的GingisREX對離液劑和去液劑的穩定性和耐受性,在一系列試劑中測試了酶活性,并使用底物測定進行了評估。數據顯示,GingisREX在6M時耐受尿素,吐溫高達1%,但活性在0.1%時受到SDC的負面影響。該酶在 pH 值范圍為 5.0 至 9.0 時顯示出活性,在 pH 值為 6.5-8.0 之間。綜上所述,GingisREX可用于一鍋反應,以同時消化和變性6M尿素。與Genovis的IdeS不同,雙特異性 T 細胞接合器 (BiTE) 分子是一種融合蛋白療法,其中兩個 scFv 融合,形成一個雙特異性分子,其中一個 scFv 靶向細胞毒性 T 細胞,另一個靶向Ai癥抗原。該蛋白質由四個蛋白質結構域組成,兩個 scFv 均由 VL 和 VH 區域組成,總共由三個柔性 GS 連接子連接。這種蛋白質的大尺寸(54 kDa)可能對通過完整質譜法進行產品質量監測構成挑戰,因為標準MS儀器可能無法提供蛋白質的單同位素分辨率。可精確定位特定的修飾。而無需肽圖分析,可以較少的手動操作時間快速完成。江西IgGZEROIdeS蛋白酶抗體酶切
如mAb在生產或儲存過程中的氧化,它可能會影響zhiliao產品的質量。河北FabRICATORIdeS蛋白酶蛋白組學
如果您想分析單克隆抗體或單克隆抗體分子,現在有了Genovis的一些新產品(IgA酶,IgM酶),其他的模式和分子形式(IdeS高通量的產品形式)來測定和監測許多不同的CQA,Genovis可以緩解使用不同分析方法時可能出現的瓶頸。 生產大量的樣品當然很好,但如果分析團隊不能足夠快地處理它們,那就沒有什么意義了。 高通量分析需要一致的、易于使用的方法,當然這些方法要快速,而且可能易于自動化。 這正是我們所能提供的,這使Genovis能夠支持更多不同功能的客戶。河北FabRICATORIdeS蛋白酶蛋白組學