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IgGZEROIdeS蛋白酶抗體酶切

來源: 發布時間:2024-05-14

抗體由于其大小和復雜性,是一種難以表征的分子。偶聯藥物有效載荷是對抗Ai癥等疾病的一種有吸引力的方法,但進一步增加了異質性的復雜性和風險。抗體藥物偶聯物 (ADC) 需要像任何其他基于 IgG 的生物制藥一樣進行仔細和詳細的表征,并且需要適當的分析工作流程。Genovis的FabRICATOR(IdeS)酶將ADC消化成其亞基,可以詳細表征這類復雜的藥物。Genovis的內切糖苷酶 IgGZERO和 GlycINATOR 還可以研究完整的 ADC,但降低復雜性并提高分辨率。發現GingisREX精氨酸殘基的特異性,Arg-C在賴氨酸和其他殘基的非特異性。IgGZEROIdeS蛋白酶抗體酶切

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與IdeS不同,度拉糖肽由兩個胰高xue糖素樣肽-1 (GLP-1) 分子組成,它們通過柔性 GS 接頭連接到人 IgG4 的 Fc 區域。為了分別研究肽和 Fc 區域,從而鑒定結構域特異性 PTM,用 Genovis的GlySERIAS 在 37°C 下凍干消化度拉糖肽 1 小時。為了降低樣品復雜性,使用內切糖苷酶GlycINATOR Lyophilized去除Fc聚糖,并用DTT還原鏈間二硫鍵。反相LC-MS對樣品的分析表明,使用GlySERIAS進行連接子消化后,肽從Fc區域完全去除。連接子中的大量甘氨酸殘基為GlySERIAS提供了許多不同的潛在消化位點,這就是為什么Fc/2和GLP-1肽都被檢測為幾種變體,其中不同數量的甘氨酸和絲氨酸殘基仍然連接。此外,還鑒定了GLP-1肽的氧化。盡管GlySERIAS同時在多個位點進行消化,但一式三份的酶解在獲得的不同Fc/2變體的相對量中顯示出可重復的結果。廣東GingisREXIdeS蛋白酶蛋白組學Genovis將固定化酶固定在磁珠上,用于在鉸鏈下方自動消化 IgG。

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與IdeS不同,Genovis的GlySERIAS是一種獨特的酶,可消化柔性富含甘氨酸的融合蛋白連接子,例如Gly4Ser和GlyxSery(GS)以及聚甘氨酸(G)接頭。該酶能夠分離多功能融合蛋白的各個結構域,以促進表征并增加對這些分子的理解。融合蛋白的中級分析既可以降低整體樣品的復雜性,又可以對翻譯后修飾進行結構域特異性鑒定和監測。為了改善連接子的去除,Genovis建議使用GlySERIASImmobilized。對于連接子表征,我們推薦GlySERIAS凍干。具有柔性接頭的獨特酶消化融合蛋白;中級方法可降低融合蛋白表征的復雜性;復雜融合蛋白的可靠且可重復的消化。Genovis的GlySERIAS酶切由甘氨酸或甘氨酸和絲氨酸殘基的重復序列組成的柔性連接子。該酶在天然反應條件下具有活性,能夠對復雜的融合蛋白進行中級表征。連接子區域同時在多個位點被消化,導致先前連接的組分分離。活性發生在pH7.6下,孵育時間可以根據所需的產物而變化。GlySERIAS是從噬菌體K克隆而來的,在大腸桿菌中表達。該酶含有His標簽,分子量為18kDa。

Genovis提供FabRICATOR(IdeS)驗證包。三種不同批次的凍干酶,用于驗證基于FabRICATOR的分析方法。FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體,產生均質的F(ab')2和Fc片段。FabRICATOR酶已成為生物制藥行業中使用的工具,用于表征用于zhiliao用途的單克隆抗體、Fc融合蛋白、ADC和生物仿制藥。每批FabRICATOR酶在釋放前都經過嚴格的酶活性、特性和純度測試。FabRICATOR驗證試劑盒由三批凍干酶組成,使方法驗證更容易。每批都附有一份分析證書。QC應用的簡化方法驗證;批次間變異性評估的理想形式;提高批量放行檢測性能的可信度。Genovis的FabULOUS (SpeB) 是一種半胱氨酸蛋白酶。

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抗體的氧化是可能影響抗體功能的關鍵質量屬性,需要密切定量和表征。它可能導致mAb的體內半衰期、功效和穩定性降低。Genovis的FabRICATOR(IdeS)消化產生的抗體亞基是研究抗體氧化的理想選擇。酶解的穩健性允許在受監管的環境中監測抗體亞基氧化。Genovis的FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體,產生均質的F(ab')2和Fc片段。該酶用于基于抗體的療法(如mAb、ADC、生物類似藥和Fc融合蛋白)的表征、質量控制、穩定性測試、生產監測和克隆選擇。高度特異性-鉸鏈下方的一個消化位點快速–在30分鐘內生成均勻的片段池實現基于抗體的生物zhiliao藥物的表征和質量控制可固定在即用型離心柱中高特異性也意味著相同的消化方案可以作為平臺方法應用于許多不同的抗體。江蘇FabRICATORIdeS蛋白酶

倍篤生物代理多條產品線,用于聚糖分析用酶、ADC偶聯技術、QED抗體對、AAV中和抗體、IdeS蛋白酶等。IgGZEROIdeS蛋白酶抗體酶切

在抗體藥物及核酸藥物領域,倍篤生物產品線涵蓋藥物研發的全流程,主要用——RNA轉染試劑、生物活性物質純化分離用填料產品、ADC的payload抗體(如anti-DXD、anti-Eribulin、anti-MMAE等)、動物造模用陽性及陰性抗體、泊洛沙姆P 188 Bio、工藝雜質及外源污染物殘留檢測產品、抗體結構域分析蛋白酶、蛋白聚糖分析水解酶等,品牌有瑞典Genovis、德國BASF、美國QED、中國君研生物、中國金傳生物、中國毫厘科技、中國再帆生物等。這些國產品牌都具有國內自研、自產能力,批次生產穩定可靠、品質可控,為行業發展提供更多國產選擇。IgGZEROIdeS蛋白酶抗體酶切