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黑龍江FabALACTICAIdeS蛋白酶

來源: 發(fā)布時間:2024-06-21

與IdeS不同,為了獲得更均勻的度拉糖肽融合蛋白的消化產物,用Genovis的GlySERIAS固定化蛋白質消化該蛋白質,該蛋白由與瓊脂糖珠共價偶聯(lián)的GlySERIAS酶組成。通過將酶偶聯(lián)到樹脂上,可以增加酶與蛋白質的比率,從而可以進一步加速反應,以獲得更完整的連接子消化。此外,該酶不會存在于樣品制備中,可能會干擾樣品分析。為了進行比較,度拉糖肽在37°C下用GlySERIAS固定化過夜,或用GlySERIAS凍干1小時并在37°C下過夜消化。 為了降低樣品復雜性,使用內切糖苷酶GlycINATOR凍干去除Fc聚糖,并減少鏈間二硫鍵。通過反相LC-MS對樣品的分析表明,GlySERIAS Immobilized幾乎完全消化了Fc結構域中的連接子,留下了接近均質的Fc/2產物,其中含有來自連接子的一個絲氨酸殘基。用 GlySERIAS 凍干 1 小時或過夜消化,兩者都會產生幾種 Fc 產物,并附著不同數(shù)量的絲氨酸和甘氨酸殘基。GLP-1肽在所有三個樣品中以兩種變體存在。使用GlySERIAS固定化消化的均質Fc/2能夠詳細研究特定于Fc區(qū)域的質量屬性。此外,在樣品中未觀察到干擾分析的酶峰。作為補充,F(xiàn)c/2 產物在用 GlySERIAS 凍干消化后殘留部分連接子,有助于研究位于 GS 連接子的修飾。如Thermo Scientific? KingFisher? ;在振動臺上也能同樣出色地工作。黑龍江FabALACTICAIdeS蛋白酶

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與IdeS不同,Genovis的IgMBRAZOR是一種獨特的IgM特異性蛋白酶,可在重鏈中CH2結構域下方的一個特定位點消化人IgM,產生均質的F(ab')2和Fc片段。該酶能夠對復雜和高分子量的人IgM進行中級分析,從而促進疫苗、zhiliao和診斷等過程中的IgM表征。獨特-可實現(xiàn)IgM的中級表征和質量控制;快速–在30分鐘內生成均勻的F(ab')2和Fc片段;高度特異性–人IgM重鏈中的一個消化位點。IgMBRAZOR是一種獨特的IgM特異性酶,可在重鏈中CH2結構域下方的一個特定位點消化人IgM,產生F(ab')2和Fc片段。消化在30分鐘內完成,并且由于酶的特異性,如果孵育時間延長,則不存在過度消化的風險。該酶在pH值為5.5至9.0時具有活性,不需要還原條件或輔助因子即可發(fā)揮活性。良好的活性是在37°C下,但也可以在室溫下使用增加孵育時間進行消化。IgMBRAZOR在大腸桿菌中表達。該酶含有His標簽,分子量為38kDa。河南FabRICATOR ZIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶可用于研究特定Fc區(qū)域的質量屬性,有助于研究GS連接子的修飾。

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Genovis的FabRICATOR Fab2 (IdeS)試劑盒可消化兔 IgG,但要在親和步驟中捕獲 Fc 片段,您需要另一種填料,而不是試劑盒中通常包含的 CaptureSelect? Fc。如果您對處理兔IgG感興趣,請聯(lián)系Genovis團隊,我們將在FabRICATOR Fab2試劑盒中提供與兔Fc相容的樹脂色譜柱。使用FabRICATOR的抗體消化的簡單性、速度和可重復性也意味著這種酶可以被用于質量控制應用。 QC方法需要執(zhí)行簡單,易于訓練,高度可重復,數(shù)據(jù)易于分析,這正是您使用FabRICATOR所得到的。 因為它適用于一系列不同的IgG,這也意味著使用FabRICATOR進行QC工作的客戶將能夠在未來的產品中使用它。 這顯示了這種酶在抗體消化中是多么的有效。

與IdeS不同,Genovis的GingisKHAN(Kgp)是一種半胱氨酸蛋白酶,可在鉸鏈上方的單個位點(KSCDK/THTCPPC)消化人IgG1,產生完整且均質的Fab和Fc片段。GingisKHAN是一種賴氨酸特異性蛋白酶。單一的消化位點是人IgG1三維結構的結果,使這種賴氨酸暴露于酶中。如果去除N-聚糖,則Fc上暴露的賴氨酸處可能會出現(xiàn)額外的消化位點。GingisKHAN需要溫和的還原條件才能具有活性,并且在37°C和pH8下獲得活性。還原劑(2mM半胱氨酸)與酶一起提供。GingisKHAN是從牙齦卟啉單胞菌中純化的。該酶用于使用LC-MS表征基于抗體的生物zhiliao藥物,研究Fc聚糖分析、雙特異性抗體、親和力和親和力效應,并鑒定翻譯后修飾。用 Genovis的GlySERIAS Immobilized消化雙特異性 T 細胞接合器(BiTE)分子。

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Genovis提供具有低水平內Du素的FabRICATOR(IdeS)凍干酶,用于IgG的鉸鏈以下消化。FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體,產生均質的F(ab')2和Fc片段。FabRICATORLowEndotoxin以凍干粉的形式提供兩種不同規(guī)格:2000和5000單位,分別用于消化2mg或5mgIgG。該產品配方每瓶的內Du素含量較低,2000單位小瓶的內Du素含量為<0.04EU/瓶,5000單位小瓶的內Du素含量為<0.10EU/瓶。有效消化,內DU素水平低;適用于靈敏的體內或基于細胞的檢測。Genovis提供半胱氨酸蛋白酶 FabALACTICA (IgdE)。重慶FabULOUSIdeS蛋白酶

FabRICATOR(IdeS)酶是生物制藥行業(yè)中普遍使用的工具。黑龍江FabALACTICAIdeS蛋白酶

其他基于 IgG 的生物制藥需要仔細表征和監(jiān)測關鍵質量屬性,例如氧化、糖基化和其他翻譯后修飾。與抗體的克隆選擇、工藝開發(fā)和穩(wěn)定性研究相關的大量樣品通常通過液相色譜質譜 (LC-MS) 進行分析。然而,在LC-MS之前進行足夠規(guī)模的樣品制備通常具有挑戰(zhàn)性。為了解決樣品制備的挑戰(zhàn),Genovis將半胱氨酸蛋白酶FabRICATOR(IdeS)固定在磁性瓊脂糖珠上,現(xiàn)在稱為FabRICATOR MagIC。FabRICATOR固定在磁珠上,可同時快速自動消化多種抗體,促進中級表征工作流程。Genovis的FabRICATOR MagIC 如何以較少的用戶交互減少實驗和操作時間,降低樣品處理錯誤的風險,同時提高通量。黑龍江FabALACTICAIdeS蛋白酶