盤,請在步驟5之后插入托盤。有關詳細信息,請參閱“抗體恢復”部分。 6.在整個表面上涂適量的一抗吸墨紙架的數量(對于MultiBlot為2.5毫升,對于迷你吸墨紙為5毫升,或10 mL用于Midi印跡)。7.在室溫下孵育10分鐘。解決方案將是吸收到污點固定器中,表面可能會變干。重要提示:請勿在吸塵器清潔后再使用真空吸塵器。孵育10分鐘。8.向下壓框架并施加真空。等待5-8秒,直到框架完全是空的。9.在連續運行真空的情況下,添加30 mL洗滌緩沖液(MultiBlot為15毫升)。重復洗滌步驟3次以上(總共4次洗滌)。當框架完全為空時,將TURN真空關閉。10.在印跡架的表面上涂適量的二抗(對于多印跡,為2.5 mL,5毫升用于迷你印跡,或10毫升用于Midi印跡)。在室溫下孵育10分鐘,然后上海益啟生物電阻儀訂購方便。長寧區MerckAmicon攪拌式過濾器Merck儀器銷售
關閉真空。同樣,溶液將被吸收到印跡架中,并且表面可能看起來干燥。重要提示:孵育10分鐘后,再抽真空。11.向下壓框架并施加真空。等待5至8秒鐘,直到框架完全空了。真空運行連續添加30 mL洗滌緩沖液(對于MultiBlot為15 mL)。重復洗滌步驟3次(共3次)4次洗滌)。12.關閉真空,然后從框架上取下吸墨架。從污點固定器中取出污點,并與適當的檢測試劑。如果使用了MultiBlot孔空白,則卸下并清洗。 擴展一級抗體孵育:一小時至過夜1.執行《通用議定書》的步驟1至5。2.加入2.5 mL(對于MultiBlot),5 mL(對于Mini blot)或10 mL(對于Midi blot)1X一抗(濃縮液)通常在標準免疫檢測過程中使用)。3.用蓋子蓋住吸墨紙固定架。如果需要的話,將其從底座浦東新區Merck手持細胞計數器Merck儀器參數上海益啟生物微流控細胞芯片分析儀訂購方便。
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白的免疫檢測:SNAP i.d.“ 2.0系統與SNAP 1.d.系統(首先代)與標準免疫檢測一種。 SNAPi.d。 2.0蛋白質檢測b。快照蛋白質檢測。標準系統Midi印跡系統首先代,單孔免疫檢測對照,茴香霉素處理和PDGF處理的3T3小鼠成纖維細胞裂解液(10-0.63 ug)被轉移到Immobilon9-P膜上。印跡被阻止含0.5%的非脂肪干mik(NFDM),并在加筋的鹽水中制備含0. 1%Tweene 20表面活性劑(TBST),并用主要抗B-Tubulin探測(MAB3408)和次級HRP偶聯的山羊螞蟻(AP1 24P)在上述條件。將印跡暴露于X射線膠片一分鐘。圖2. erbB2的免疫檢測:SNAP i.d.9 2.0系統與SNAP i.d.系統(首先代)與標準免疫檢測s。 S上海益啟生物的WB實驗加速器詢價公司電話。
用SNAP i.d.o 2.0系統 系統設置 1.將SNAP i.d.9 2.0底座放在水平工作臺上。2.通過推動管道末端的聯接插件,將真空管道連接至系統背面。插入系統基座背面的快速斷開接頭,直至其滑動。注意:要斷開管路連接,請用食指將管路連接器下方的卡舌向上推,然后將其拉出。管出來。3.將管道的另一端連接到真空源。使用一升的真空燒瓶作為疏水閥和一個Millex-FA。過濾器(目錄號SLFA05010)可保護真空源不受污染,如下所示。注意:任何可以產生410毫巴(12 inHg)和34 L / min的真空源就足夠了。如果是真空如果源的工作溫度高于410毫巴,則SNAP i.d.2.0系統將自動調節真空度壓力。如果真空源不足,則流經系統的流量可能會不一致,從而導致更長的時間。處理時間和/或抗益啟生物公司帶您了解樣本制備儀詳情。靜安區MerckSNAPi.d.2.0加速器Merck儀器咨詢報價
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