取上述200μL細(xì)胞液加入小室,下室(培養(yǎng)板)加入900L含有10% FBS的培養(yǎng)基。不同規(guī)格的小室和培養(yǎng)板所加的體積不同,具體參考Millicell?產(chǎn)品說明書。37°C孵育24至72小時(shí),依據(jù)**細(xì)胞類型而定。孵育結(jié)束,小心取出細(xì)胞小室,吸掉小室上層培養(yǎng)液,PBS清洗一遍,70%酒精或者4%多聚甲醛固定5min,0.5%結(jié)晶紫(2%乙醇或PBS溶解)染色20min,然后進(jìn)行第8步或者第9步。PBS清洗兩次以去除多余的染料,立即用棉簽擦去濾膜上層的細(xì)胞,自然靜置風(fēng)干。顯微鏡下觀察濾膜下層的細(xì)胞,隨機(jī)選取不同的視野計(jì)數(shù)并算平均值。結(jié)晶紫溶解濾膜下層細(xì)胞,然后用33%醋酸脫色,將結(jié)晶紫完全洗脫下來,洗脫液可在酶標(biāo)儀上570nm讀取OD值。這種方法可以避免視野下細(xì)胞穿透不均勻帶來的誤差。上海益啟生物培養(yǎng)小室訂購方便。上海血清細(xì)胞培養(yǎng)代理價(jià)格
?InhibitorSelect?激酶家族***劑文庫 ?StemSelect?干細(xì)胞調(diào)節(jié)劑文庫 ?大包裝定制***劑 ?定制小分子化合物庫 細(xì)胞培養(yǎng)器具 更好的細(xì)胞形態(tài)學(xué) 因?yàn)榭杀憷貜母鞣较颢@取營養(yǎng),故細(xì)胞在膜上生長比在塑料上生長更好。 Millicell @單孔細(xì)胞培養(yǎng)小室 細(xì)胞生長在膜上較塑料基質(zhì)更接近自然狀態(tài) Millicell?單孔插入式細(xì)胞培養(yǎng)小空分為懸掛式和站立式兩類,無論貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞都可以從其上下兩側(cè)吸收培養(yǎng)基。因此,細(xì)胞的生長、結(jié)構(gòu)及其功能都更接近發(fā)生在體內(nèi)的情況。而且, Millicell?插入式細(xì)胞培養(yǎng)小窒使得單層細(xì)胞的上下兩面進(jìn)行研究成為可能。上海血清細(xì)胞培養(yǎng)代理價(jià)格益啟生物公司帶您了解Transwell小室詳情。
主要優(yōu)點(diǎn) ●光學(xué)性能好,便于獲得***影像數(shù)據(jù),包括活細(xì)胞顯微觀察成像,共聚焦及差分干涉顯微成像等 ●提供4種不同樣式,可根據(jù)研究需要靈活選擇 ●惰性無毒材料支持持續(xù)數(shù)周的培養(yǎng)觀察 Millicell? 和MultiScreen? 多孔板 無論您正從事哪方面應(yīng)用,總能在默克密理博品種齊全的多孔板中找到合適的產(chǎn)品。MultiScreen? 在藥物研發(fā)和生命科學(xué)研究中作為一個(gè)可靠的工具有著悠久的應(yīng)用歷史,常被用于樣品制備,受體結(jié)合測試,可溶性測試,PAM***CR產(chǎn)物純化,蛋白濃縮,新藥篩選,全組織檢測等等。Millicell? 插入式細(xì)胞培養(yǎng)板適用于藥物轉(zhuǎn)運(yùn),鈉鹽熒光通透性實(shí)驗(yàn),細(xì)胞凋亡,遷移,端粒酶活性以及細(xì)胞黏附實(shí)驗(yàn)。
獨(dú)特設(shè)計(jì),易于使用 不同品牌的插入式細(xì)胞培養(yǎng)小窒可能看起來都較為類似,但Merck Millipore產(chǎn)品融合了許多獨(dú)特的設(shè)計(jì)能使您的工作更簡便。 產(chǎn)品種類齊全,更多選擇 您可以根據(jù)研究要求,選擇**合適的膜材質(zhì)及產(chǎn)品類別。我們既提供懸掛式和站立式的單孔插入式細(xì)胞培養(yǎng)小空,也有24孔或96孔的插入式細(xì)胞培養(yǎng)板。 膜的種類 Biopore 膜(親水性PTFE* 低蛋白吸附、可進(jìn)行活細(xì)胞觀察以及免疫熒光的應(yīng)用Biopore相對(duì)于其它膜材質(zhì),在用于熒光染色時(shí),具有較低的背景或者無背景。而且其良好的透明度利于對(duì)活細(xì)胞的觀察。經(jīng)優(yōu)化,可用于低蛋白結(jié)合和低熒光的應(yīng)用。采購培養(yǎng)小室哪家靠譜?
c ) 用無血清的冷培養(yǎng)基稀釋ECM 膠至2 0 μ g/mL ,以5-10μg/cm2的密度加入到細(xì)胞小室的上層(按照ECM產(chǎn)品說明書的推薦比例和體積),輕輕搖晃使膠均勻鋪在膜上。以上操 作在冰上進(jìn)行。 d)立即將鋪好ECM膠的細(xì)胞小室置于培養(yǎng)板中,于37°C孵育1小時(shí),ECM膠可由液體凝成固體,吸走多余的或者未凝的膠。細(xì)胞用PBS清洗一次,EDTA或者0.05%胰酶消化,然后用包含5%BSA的無血清培養(yǎng)基中和,1500rpm離心5-10min。用無血清培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞密度至0.5-2.0x106cell/ml。上海益啟生物的聯(lián)系電話。奉賢區(qū)培養(yǎng)小室細(xì)胞培養(yǎng)
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常見檢測細(xì)胞: **細(xì)胞(MDA-MB-231, MCF-7, HT1080, B16F10)等,用孔徑為8μm的培養(yǎng)小室巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞 PMN:用孔徑為5μm的培養(yǎng)小室內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)、白血病細(xì)胞 K562、骨髓瘤細(xì)胞HB124:用孔徑為 3μm或5μm的培養(yǎng)小室 具體操作: 以配合24孔板的8μm PET膜Millicell?懸掛式細(xì)胞培養(yǎng)小室(cat#MCEP24H48)為例,實(shí)驗(yàn)周期:3-5天 復(fù)蘇代數(shù)靠前的**細(xì)胞,在含有10%FBS的培養(yǎng)基中預(yù)先培養(yǎng)2-3代,待細(xì)胞匯合達(dá)到80%左右,饑餓處理18-24小時(shí)。 準(zhǔn)備鋪膠: a) 4 °C融EMC膠過夜。 b) 將細(xì)胞小室、培養(yǎng)板和***頭等于4°C 預(yù)冷。上海血清細(xì)胞培養(yǎng)代理價(jià)格