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福建高分子熒光染料

來源: 發布時間:2024-06-23

其他細胞結構常用染料生物染料在細胞結構和組分鑒定中有著廣泛的應用,除細胞膜研究外,我們經常也會對一些其它細胞結構及成分進行探索,例如線粒體、溶酶體、蛋白質、細胞核等,而對于不同的細胞結構有不同的染料進行染色細胞染色神器DAPI+PhalloidinDAPI染色液(DAPIStainingSolution)常用于細胞核染色,可將細胞核染成藍色。鬼筆環肽(Phalloidin)是細胞骨架的染色神器,羅丹明標記的Phalloidin(TRITC-Phalloidin)可將細胞染成橙紅色,DAPI與Phalloidin染色液是研究細胞形態變化時經常用到的兩種共染的試劑,染色效果可見A1-E1用TRITC-鬼筆環肽(橙紅)染色的細胞骨架免疫熒光圖;A2-E2用DAPI(藍色)染色的細胞核免疫熒光圖;A3-E3合并的L929細胞免疫熒光染色圖。是S100A16過表達或下調前后PDAC細胞形態的變化。南京星葉生物熒光染料標記蛋白。福建高分子熒光染料

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蛋白熒光標記技術是目前**為常見的蛋白體外標記技術,利用級聯放大反應原理,將極度敏感性且易于檢測的熒光素通過某個基團吸附或共價結合后,標記到特異性抗原或抗體分子上,應用熒光顯微鏡觀察熒光標記物因增強放大效應而產生顏色、光譜等變化,以分析示蹤相應抗體或抗原性質與含量的方法。該技術在具有高度精確性的熒光顯微鏡下,借助高度靈敏性的熒光檢測,在各種生物過程中對目的蛋白進行可視化,從而通過抗原抗體高度特異性免疫定量表達或在細胞研究中定位。蛋白熒光標記已成為研究蛋白質互作、酶活性、***示蹤以及細胞分選重要工具。蛋白標記常用熒光染料隨著蛋白熒光標記技術不斷發展,各類熒光素廣泛應用于生物實驗中,目前常用標記蛋白/抗體的熒光素主要有BODIPY類、香豆素類、羅丹明類、近紅外類、NBD胺類以及菁染料等。南京星葉生物科技有限公司提供多種性價比高的各類活化熒光素,其熒光染料覆蓋波長范圍從350nm到790nm,例如Cy系列、SuperFluor系列(效果同AlexaFluor系列)等,用于標記抗體、多肽以及蛋白功能基團,繼而生成分子探針,通過熒光成像進行相應檢測。中國香港成都熒光染料吲哚菁綠的主要作用之一是在醫學影像學中作為造影劑。

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InvitrogenCy3染料是一種明亮的橙色熒光染料,可使用532nm激光線激發,并使用TRITC(四甲基羅丹明)濾光片組進行可視化。除了免疫細胞化學應用,Cy3染料通常用于標記核酸。發光說明:Cy3熒光團也是親脂性神經元和長期DiI細胞追蹤試劑的基礎,該試劑添加烷基尾(≥12個碳)添加到**熒光團上。Cy3染料是用于成像、流式細胞術和基因組應用的蛋白質和核酸結合物的傳統橙色熒光標簽。它也是經典親脂性示蹤劑DiI及其變體的基礎。根據化學結構,Cy3可分為普通Cy3(常簡稱Cy3)和磺化Cy3(Sulfo-Cy3)。Cy3水溶性較低,在水相標記反應時常常需要使用有機共溶劑,常用有機溶劑包括DMF,DMSO和乙腈等。磺化Cy3是在Cy3的結構基礎上磺化的產物,附帶2個或3個磺酸根離子。由于磺化效應,磺化Cy3的亮度比Cy3稍亮,熒光穩定性也提高,可賴受更長時間的曝光。磺化Cy3水溶性極高,所以在標記反應中不需要使用有機共溶劑,特別適合標記蛋白等對有機溶劑敏感的生物分子。另外磺化Cy3水溶性極好,并且染料分子本身帶電荷,標記到蛋白表面后不會引發疏水性蛋白聚集,提高熒光標記產物的穩定性。當然,磺化Cy3-NHS也可溶于甲醇,DMSO,DMF等有機溶劑,標記反應也可以在純有機溶劑中進行。

細胞培養后,需要對其生長情況、形態甚至生物學性狀進行觀察。由于細胞小而復雜,若不借助適當的手段,難以觀察其形態、結構,更難發現細胞內各種組分的分子組成及功能。目前,已有多種研究細胞的技術,從光學顯微鏡到電子顯微鏡,從一般細胞化學法到免疫化學法。細胞染色是研究細胞生物學特征的一種常用手段,然而,對于細胞實驗新手來說,想要獲得一張漂亮的細胞染色圖并不容易。染色試劑不會選、細胞染色不均勻、染色時切片脫落等都是很常見的問題。

細胞膜常用染料DiD、DiR、DiO和DiI染料是最常見的細胞膜染料(見表2),它們是一族親脂性的熒光染料,用于細胞的形態學和結構研究。該系列染料進入細胞膜后,會在整個細胞膜上側向擴散,在比較好濃度時可以使整個細胞膜染色。其中DiD染料的染色效率高,染色均一,熒光不易猝滅,無明顯細胞毒性,且受自身熒光背景干擾小。目前DiD已成功應用于多種細胞的體內示蹤研究,如Treg細胞、間充質干細胞、腫瘤細胞、造血干祖細胞等。 DiD,DiO,DiI,DiR和DiS 染色的細胞可以分別用經典的FL1,FL2,FL3和FL4流式細胞儀檢測。

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DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料,可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結構。當與細胞膜結合后其熒光強度**增強,這類染料有著很高的淬滅常數和激發態壽命。一旦對細胞染色,這類染料在整個細胞膜上擴散,比較好濃度時可以使整個細胞膜染色。它們的熒光顏**分明顯:DiI(橙色熒光),DiO(綠色熒光),DiD(紅色熒光)和 DiR (深紅色熒光)這使得他們可以用來對活細胞進行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分別用標準的 FITC和TRITC的濾光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激發,有著比DiI更長的激發波長和發射波長,在細胞和組織染色中更有價值。 DiR的紅外熒光可以穿透細胞和組織,在***成像中用來示蹤。Super Fluor 680(效果同Alexa Fluor 680)琥珀酰亞胺酯熒光染料。免疫熒光熒光染料納米

PI是一種可對DNA染色的細胞核染色試劑,它在嵌入雙鏈DNA后釋放紅色熒光。福建高分子熒光染料

異硫氰酸熒光素(FITC)是一種有機熒光染料,目前,這種熒光染料仍用于免疫熒光和流式細胞術中。在495/517nm處,該染料會產生激發/發射峰值,并可借助異硫氰酸鹽反應基團與不同抗體結合,該基團可以和蛋白質上的氨基、巰基、咪唑、酪氨酰、羰基等基團相結合。而它的基本成分——熒光素,其摩爾質量為332g/mol,常被用作熒光示蹤劑。FITC(389g/mol)是用于熒光顯微鏡技術的首批染料,且其被當成AlexaFluor®488等后續熒光染料的發端。該染料的熒光活性取決于它的大共軛芳香電子系統,而該系統受藍色光譜中的光所激發。經常與FITC同時使用的另一種染料是與其相似的TRITC[四甲基羅丹明-5(6)-異硫氰酸]。與FITC相反,TRITC并非熒光素,而是羅丹明家族的衍生物。羅丹明也具有一個大的共軛芳香電子系統,正是該系統引發了它們的熒光行為。還有一點與FITC相反,TRITC(479g/mol)由比較**長為550nm的綠色光譜中的光所激發,它的比較大發射波長為573nm。與蛋白質(例如,抗體)結合也基于異硫氰酸鹽反應基團。福建高分子熒光染料