影響物理轉染或機械轉染效率的因素在很大程度上取決于這些方法的基本原理。例如，電穿孔技術依賴于電場來增加宿主細胞膜的通透性，以內化外來核酸。因此，電穿孔過程中的電壓和持續時間是決定電穿孔成功與否的重要因素。施加高壓的長時間電穿孔可能會導致細胞損傷并降低轉染效率。通過增加電脈沖的數量也可以提高電轉染效率，但這可能會降低細胞活力。另一方面，電轉染效率取決于所使用的細胞類型，每當要電轉染一種新的細胞類型時，應優化電穿孔條件。一些細胞如T淋巴細胞，即使在標準的電穿孔條件下也可能轉染不良，而電轉染成纖維細胞通常可以產生良好的轉染結果。電穿孔緩沖液的組成是影響轉染效率的另一個關鍵參數。據報道，電穿孔緩沖液中的ATP酶抑制劑如利多卡因可提高電穿孔后的細胞活力，而使用K+-based緩沖液的轉染效率優于Mg2+-based緩沖液。假設Mg2+離子在***ATP酶以恢復電穿孔后的離子穩態中發揮關鍵作用，以比較大限度地減少細胞死亡，但可能會降低轉染效率。因此，應優化由多種成分組成的合適的電穿孔緩沖液配方，以確保轉染效率和電穿孔后細胞活力之間的平衡。用二乙基氨基乙基修飾，右旋糖酐鏈的酰胺化很容易被質子化，這使得它可以自組裝成帶負電荷核酸的納米顆粒。肝臟轉染試劑現貨

PHP是由天然來源的羥基脯氨酸(如膠原蛋白、明膠和其他蛋白質)制成的，是***個用作基因載體的聚酯。在生理環境中，PHP可以在不到兩個小時的時間內失去其初始分子量的50%。然而，PHP完全分解為其等效單體需要三個月的時間，分解產物是單體羥脯氨酸。雖然PHP酯在溶液中單獨存在時降解很快，但與DNA絡合時更穩定。將PHP酯/pSV-gal復合物轉染CPAE細胞，測定PHP酯作為基因傳遞載體的活性。由于聚L-賴氨酸是**常用的基因轉運聚合物，PHP酯的轉染效率與聚L-賴氨酸相當。轉染效果隨著PHP酯濃度高于DNA濃度而增加。PHP酯轉染細胞的能力不受FBS存在的影響。結果表明，PHP酯是一種潛在的基因載體。神經細胞轉染試劑教做轉染試劑的凍融被認為是另一個可能影響轉染效率的潛在因素。

脂質顆粒的加入導致內體DNA釋放增加。Delgado等人通過在腎細胞中添加魚精蛋白，設法提高了固體脂質納米顆粒的轉染效率，但與不添加魚精蛋白的對照組相比，相同的多功能單元，DNA/魚精蛋白/SLN(固體脂質納米顆粒)，降低了HEK 293細胞系(人胚胎腎細胞)的轉染效率。這給了我們希望，通過加入必要的配體的可能性，使用納米顆粒的轉染可能會調整到給定的細胞類型。Bahrami et al.經表明，不同種類的納米顆粒以不同的方式與細胞膜結合。形成這些鍵的差異取決于它們的球形或非球形形狀，也取決于不同納米顆粒所表現出的各種粘附電位以及它們進入后引起的膜形狀變化。Prabha等人的實驗表明，納米顆粒的大小對COS-1(非洲綠猴腎細胞)和HEK 293細胞系的轉染效率有***影響:使用較小的納米顆粒時，轉染效率分別是使用較大納米顆粒的27倍和4倍。在兩種分散體中，小顆粒和大顆粒的細胞攝取、表面電荷和DNA釋放是相同的，這表明使用納米顆粒進行基因傳遞的效率受到許多因素的影響，它們的使用應該根據細胞類型和應用條件進行具體調整。此外，用作納米顆粒分散劑的不同物質，如十六種不同類型納米顆粒的豬肺表面活性劑和牛血清白蛋白，對其在溶液中的團聚有***影響。

化學轉染可分為基于脂質體或非基于脂質體。基于脂質體的轉染試劑是一種化學物質，它能夠形成帶正電的脂質聚集體，這些聚集體可以與宿主細胞的磷脂雙分子層順利融合，從而允許外來遺傳物質以**小的阻力進入。另一方面，非脂質體轉染試劑可進一步分為幾類，包括磷酸鈣、樹狀大分子、聚合物、納米顆粒和非脂質體。磷酸鈣是轉染中使用的低價的化學物質之一，轉染涉及將帶正電的鈣離子(Ca2+)與帶負電的核酸結合，形成沉淀，然后被宿主細胞吸收。然而，磷酸鈣轉染的成功率較低，需要事先優化才能達到較高的轉染效率。樹狀大分子是三維的、高度支化的有機大分子，可以與核酸形成復合物，作為一種替代的非脂質體轉染試劑，它優于磷酸鈣。然而，使用樹狀大分子的轉染效率仍然低于病毒載體和脂質體試劑。陽離子聚合物也可以與帶負電荷的核酸形成復合物，這有助于細胞通過內吞作用吸收遺傳物質。與病毒載體相比，陽離子聚合物產生的細胞毒性較小，但效率也較低。納米顆粒由于其體積小，增強了核酸進入宿主細胞的能力，正在成為非脂質體轉染的替代選擇。PHP是由天然來源的羥基脯氨酸(如膠原蛋白、明膠和其他蛋白質)制成的，是一個用作基因載體的聚酯。

由于CRISPR/Cas的發現，基因組編輯領域經歷了一場**。細菌免疫系統的CRIPSR/Cas成分導致全基因組雙鏈DNA斷裂，并通過內部DNA修復過程促進基因編輯。有研究指出，陽離子聚合物聚乙二胺-環糊精(PC)有助于編碼Cas9和sgRNA的質粒的有效遞送。當大質粒通過PC傳遞時，它們可以以高N/P比聚結并包裹質粒;這有效地編輯了兩個基因組位點:血紅蛋白亞基β(19.1%)和菱形5同源物1(RHBDF1(7.0%))。研究人員開發了巨噬細胞特異性啟動子驅動的Cas9表達質粒(pM458和pM330)，并將其包裹在陽離子脂質輔助PEG-b-PLGA納米顆粒中，以解決無法在靶組織和細胞中進行精確基因編輯的問題(CLAN)。基于陽離子聚合物的基因***在臨床試驗中顯示出巨大的潛力，但由于研究仍處于早期階段，目前大多數研究都處于臨床前階段。deae-葡聚糖是一種化學修飾的葡聚糖類似物。陜西干細胞轉染試劑

陽離子脂質體合成中常用的分子是中性脂質二油基磷脂酰乙醇胺(DOPE)。肝臟轉染試劑現貨

納米顆粒，由于其在DNA轉運到細胞中的保護能力，在不久的將來可以用作轉基因的非病毒載體。通過將納米粒子與許多不同的配體和化合物連接來修飾納米粒子，有助于改善它們在細胞內的運輸。將納米顆粒靶向到細胞內的特定位置，配子和胚胎，可以通過磁轉染來實現。盡管與市售的用于體外培養細胞的轉染試劑相比，使用納米顆粒轉染具有相當的效率和更低的細胞毒性，但仍需要證明以這種方式傳遞DNA會導致體內相似水平的基因表達，特別是考慮到該技術可能導致副作用。肝臟轉染試劑現貨