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山東細胞熒光染料

來源: 發布時間:2024-10-21

熒光染料:能發出熒光的染料。在吸收紫外線或可見光后,能把短波長的光轉變為波長較長的可見光波而反射出來,呈閃亮的鮮艷色彩。例如,酸性曙紅、熒光黃、紅汞以及某些分散染料等。它們大多是含有苯環或雜環并帶有共軛雙鍵的化合物。熒光染料可以單獨使用,也可以組合成復合熒光染料使用。其中復合熒光染料是利用熒光共振能量轉移技術合成的熒光染料,由距離非常近、能量可以在彼此間傳遞的一個供體及一個受體熒光物分子所組成。復合染料在受體分子的激發波長被激發,在供體分子的發射波長發射一個光子。熒光染料發展非常迅速,已開發的用于科研和臨床應用的熒光染料已基本覆蓋了由紫外到可見光及紅外的整個光譜范圍。Hoechst 33342是一種可透過細胞膜并對DNA染色的細胞核染色試劑,它在嵌入雙鏈DNA后釋放強烈的藍色熒光。山東細胞熒光染料

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其他細胞結構常用染料生物染料在細胞結構和組分鑒定中有著廣泛的應用,除細胞膜研究外,我們經常也會對一些其它細胞結構及成分進行探索,例如線粒體、溶酶體、蛋白質、細胞核等,而對于不同的細胞結構有不同的染料進行染色細胞染色神器DAPI+PhalloidinDAPI染色液(DAPIStainingSolution)常用于細胞核染色,可將細胞核染成藍色。鬼筆環肽(Phalloidin)是細胞骨架的染色神器,羅丹明標記的Phalloidin(TRITC-Phalloidin)可將細胞染成橙紅色,DAPI與Phalloidin染色液是研究細胞形態變化時經常用到的兩種共染的試劑,染色效果可見A1-E1用TRITC-鬼筆環肽(橙紅)染色的細胞骨架免疫熒光圖;A2-E2用DAPI(藍色)染色的細胞核免疫熒光圖;A3-E3合并的L929細胞免疫熒光染色圖。是S100A16過表達或下調前后PDAC細胞形態的變化。江蘇合肥熒光染料南京星葉生物熒光染料標記蛋白。

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異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC):FITC是應用*為***的一種熒光素,經激光激發后發出明亮的黃綠色熒光,*大發射波長為525nm。FITC的熒光強度受PH影響較大,常隨著PH的降低而減弱,因此,在使用FITC時需格外注意溶液的酸堿度。a)電泳分離后的蛋白質檢測(b)蛋白質和肽的微測序分析(c)使用毛細管區帶電泳進行分子分析(d)生物相互作用中的分子跟蹤和檢測(e)細胞和組織切片中的抗原檢測(f)通過標記DNA片段進行細胞凋亡檢測除了因其在水中的溶解性而易于用于偶聯物制備外,異硫氰酸熒光素還具有明亮的熒光(由于偶聯后的大消光系數和高量子產率),使其成為許多工藝的優先染料。在流式細胞術和免疫熒光顯微術中,染料與各種抗體(一抗或二抗)結合,以檢查和研究IL-17免疫缺陷和CD63在腎功能中的作用等狀態。作為熒光素的衍生物,異硫氰酸熒光素含有一個異硫氰酸酯反應基團,這有助于其對通常存在于生物分子中的動漫和巰基基團具有反應性。

一:染色液制備1、配制儲液:儲液用無水DMSO或無水EtOH配制,濃度1~5mM。注:未使用的儲液建議分裝后儲存在-20℃,避免反復凍融。2、工作液制備:用合適的緩沖液(如:無血清培養基,HBSS或PBS)稀釋儲液,配制濃度為1~5μM的工作液。注:工作液**終濃度建議根據不同細胞系和實驗體系來優化。建議從推薦濃度的10倍范圍內開始比較好濃度的摸索。二:懸浮細胞染色1、加入適當體積的染色工作液重懸細胞,使其密度為1×106/mL。2、37℃孵育細胞2~20min,不同的細胞比較好培養時間不同。可以20min作為起始孵育時間,之后優化體系以得到均一的標記效果。3、孵育結束,1000~1500rpm離心5min。傾倒上清液,再次緩慢加入37℃預熱的生長培養液重懸細胞。4、重復步驟3兩次以上。D-熒光素是熒光素酶 (Luc) 的天然底物,可催化螢火蟲產生典型的黃綠色光。

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Hoechst33342是一種可透過細胞膜并對DNA染色的細胞核染色試劑,它在嵌入雙鏈DNA后釋放強烈的藍色熒光。Hoechst33342常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst33342-DNA的激發和發射波長分別為350nm和460nm。可溶于水。4.染色程序:(1)用PBS或合適的緩沖液制備10~50μMHoechst33342染料。(2)將1/10細胞培養基體積的Hoechst染料溶液加入細胞培養物中(可以用1/10濃度的Hoechst染料緩沖液代替培養基)。(3)在37℃培養細胞10~20分鐘。(4)用PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次。(5)用帶有350nm激發波長,460nm發射波長的濾光片的熒光顯微鏡觀察細胞。SUPER Green I核酸染料特點 。山東細胞熒光染料

羅丹明具有出色的光穩定性以及許多光物理特性,使其非常適合用作激光染料、熒光探針和顏料。山東細胞熒光染料

在熒光顯微術中,不僅蛋白質結構感興趣,而且對核酸也感興趣。有時有必要通過檢測細胞核來確定細胞的確切位置或數量。最常見的DNA染色劑之一是DAPI(4',6-二氨基-2-苯基吲哚),主要與DNA雙螺旋富含A-T的區域結合。與未結合態相比,DAPI在DNA上的熒光強度增加。染料被UV(紫外線)光激發,比較大激發波長為358nm。發射光譜較寬,峰值在461nm。弱熒光也可以檢測到RNA結合。在這種情況下,發射轉移到500nm。有趣的是,DAPI能夠滲透完整的細胞膜。因此,該染料既可用于固定細胞也可用于活細胞。山東細胞熒光染料