魚精蛋白作為RNA遞送穩定劑具有重要作用，其具體作用機制主要包括以下幾個方面：一、保護RNA免受降解魚精蛋白是一種天然陽離子肽混合物，由于其帶正電荷的特性，可以與帶負電荷的RNA通過相反電荷驅動耦合23。在生物系統中，RNA很容易被RNase降解，而魚精蛋白可以與RNA復合，形成穩定的復合物，從而保護RNA免受降解1213。例如，通過將單鏈RNA（ssRNA）與帶正電荷的蛋白魚精蛋白復合，可以穩定陰離子RNA1213。二、增強細胞穿透性魚精蛋白不僅可以保護RNA，還能增強RNA的穿透細胞的能力。魚精蛋白-RNA復合物的形成具有雙重功能，一方面保護RNA不被降解，另一方面增強其穿透進入細胞的能力23。這種增強的細胞穿透性可能是由于魚精蛋白的陽離子性質，使其能夠與細胞膜相互作用，促進RNA的進入細胞2。不同種類的納米顆粒轉染細胞系后，產生不同的效率、毒性和組織特異性。北京蘇州轉染試劑

    對基因表達的影響：在微小RNA-1180轉染對腎*細胞生長的影響的研究中，腎*細胞分為兩組：dsControl組和miR-1180組。實時定量（qRT）-PCR檢測p21mRNA的表達變化，結果顯示轉染miR-1180后，786-O和ACHN細胞中p21mRNA水平分別上調（P〈）和（P〈），p21蛋白表達趨勢與qRT-PCR結果相符，CDK4、CDK6和CyclinD1蛋白的表達明顯下調。同時，流式細胞術（FCM）檢測細胞周期變化顯示細胞周期被阻滯在G0/G1期，MTS結果顯示細胞活力明顯降低，集落形成實驗顯示細胞增殖能力降低。結論是miR-1180能******腎*細胞中p21蛋白的表達，并抑制腎*細胞786-O和ACHN的生長1。在微小RNA-330-5p過表達對宮頸*細胞C33A中腫瘤壞死因子受體相關因子4（TRAF4）基因表達的抑制作用和對C33A細胞增殖的影響的實驗中，通過Lipofectamine2000轉染試劑分別向宮頸*細胞系C33A瞬時轉染miR-330-5p模擬物（設為實驗組）或者轉染miR-NC（設為對照組），結果顯示與對照組相比，實驗組C33A細胞中TRAF4mRNA下降（p＜），TRAF4蛋白下降（p＜）。集落形成實驗顯示，實驗組C33A細胞的增殖能力明顯下降（p＜）。結論是miR-330-5p可通過降低宮頸*細胞C33A中TRAF4的表達抑制宮頸*細胞C33A的增殖。 北京蘇州轉染試劑基因注射包括通過注射將所需的核酸物質直接輸送到宿主細胞核中。

三、脂質體組成對轉染效率的影響不同脂質組成的影響：研究發現脂質體的組成對不同類型細胞的轉染效率有影響。例如，四種不同的DOTAP與DOPE重量比的脂質體配方對不同細胞系的轉染效率不同。Huh7和AGS細胞的比較好脂質體組成是T1P0和T3P1；COS7細胞是T3P1和T1P1；A549細胞是T1P1和T1P36。脂質體結構的影響：脂質體復合物的形狀會隨著DOPE比例的增加從層狀結構變為倒六角形結構，但在所有使用的細胞系中，特定結構在轉染效率上沒有明確的優勢6。四、其他因素的影響血清的影響：對于某些細胞，血清的存在會影響轉染效率。如Siha細胞在無血清培養基中培養時轉染效率更高，而在Caco-2細胞的轉染中，血清在本實驗室條件下并不影響轉染效率19。細胞傳代次數：Caco-2細胞在2-5次細胞傳代時轉染效率比較高9。綜上所述，脂質體轉染對不同類型細胞的影響存在多方面的差異，包括轉染效率、影響因素以及脂質體組成等。在進行脂質體轉染實驗時，需要根據不同的細胞類型優化轉染條件，以獲得比較好的轉染效果。

脂質體組成：脂質體的組成對轉染效率有重要影響。不同的脂質體可能具有不同的電荷性質、大小和穩定性，這些因素都會影響脂質體與細胞的相互作用。陽離子脂質體通常具有較高的轉染效率，因為它們可以與帶負電荷的DNA結合，并通過靜電作用與細胞表面結合。例如，Lipofectamine2000和Lipofectamine3000都是常用的陽離子脂質體，它們在不同類型的細胞中都表現出較高的轉染效率11316。脂質體的組成還可能影響其在細胞內的釋放和穩定性。一些脂質體可能更容易被細胞內的酶降解，從而降低轉染效率。小RNA和質粒DNA的共轉染可用于評估轉染效率。

對細胞周期的影響：在微小RNA-1180轉染腎*細胞的實驗中，FCM結果顯示，轉染miR-1180后，位于G0/G1期的細胞比例明顯增大，而位于S期和G2/M期的細胞比例明顯下降，表明細胞周期被阻滯在G0/G1期1。對轉染效率的影響：在脂質體介導RNA干擾質粒轉染雞成骨細胞條件的優化實驗中，對轉染前細胞融合度、質粒質量與脂質體體積比及轉染時間進行優化，在熒光倒置顯微鏡下觀察并計算轉染效率。結果表明，在轉染前細胞融合達到90％以上，質粒DNA與脂質體比例為1:2.5時轉染效率比較高，并且在轉染后48h轉染效果比較好3。在篩選更優的脂質體轉染試劑的實驗中，分別用RNAiMax及MessageMax將modGFP轉染入MEF細胞，流式分析發現MessageMax的轉染效率為（83.33%±3.23%），略高于RNAiMax的（78.77%±6.12%），兩者沒有統計學差異，但是流式分析和熒光顯微鏡觀察均表明MessageMax轉染后1周內的蛋白翻譯表達效率更高，是更高效的modRNA轉染試劑8。

RNA 轉染試劑的效果受到多種因素的影響，包括細胞類型、轉染試劑種類、轉染條件等。在實際應用中，需要根據具體的實驗需求選擇合適的轉染試劑和優化轉染條件，以提高轉染效率并減少對細胞的毒性作用。 在轉染實驗中使用對照對于確定所使用的轉染試劑和核酸的效果和效率至關重要。高分子轉染試劑檢測

脂質復合物(CLNACs)通過網格蛋白參與的內吞作用進入細胞。北京蘇州轉染試劑

陽離子殼交聯的類Knedel納米粒子作為轉染試劑結合機制：陽離子殼交聯的類Knedel納米顆粒（cSCKs）含有不同百分比伯胺和叔胺，通過與siRNA結合來發揮作用18。含100％伯胺的cSCK在HeLa細胞中的沉默效率比較高，能夠抑制人血清中siRNA降解以及轉染HeLa和小鼠巨噬細胞系。與融合的GALA肽復合可以增強iNOS在較低siRNA濃度下的siRNA沉默，這被證明可以增強攝取后的內體逃逸，進一步說明其結合機制可能涉及與siRNA的緊密結合以及促進細胞內轉運。作用特點：cSCK-pa100在HeLa細胞、293T細胞和人支氣管上皮（HEK）細胞中顯示出比Lipofectamine2000更高的沉默效率，但在人支氣管上皮（BEAS-2B）細胞和人乳腺上皮（MCF10a）細胞中可比。在小鼠巨噬細胞系中，cSCK-pa100表現出更大的iNOS沉默，并提供了更好的保護免于血清降解，證明了其作為siRNA轉染劑的潛在用途。綜上所述，不同類型的陽離子RNA轉染試劑在結合RNA分子的機制上存在差異，主要涉及靜電相互作用、納米復合物形成以及與其他分子的協同作用等方面。這些差異導致了它們在轉染效率、細胞毒性、對不同細胞類型的適用性等方面的不同特點。北京蘇州轉染試劑